第九章 免疫学应用课件.ppt

第九章免疫学应用第九章免疫学应用放射免疫测定法

(Radioimmunoassay,RIA)是用放射性核素标记抗原进行的免疫学检测技术。它将放射性核素显示的高灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合，使检测的敏感性达pg水平。常用于标记的放射性核素有I125和I131。常用于胰岛素、生长激素、药物等微量物质的测定。第九章免疫学应用Ag*AbAg标记抗原特异性抗体待测抗原(Ag*-Ab)+(Ag-Ab)抗原抗体复合物分离Ag*-Ab和游离Ag*从标准曲线上读知含量测定Ag*-Ab和/或游离Ag*放射性放射免疫测定法(RIA)示意图第九章免疫学应用RIA法原理及标准曲线7550301001101001000未标记抗原浓度（ng/ml)结合/未结合的放射活性（%）第九章免疫学应用免疫印迹法(Immunoblotting)是将凝胶电泳与固相免疫测定结合，先把电泳分区的蛋白质转移到固相载体，再用酶免疫、放射免疫等技术测定。该法能分离分子大小不同的蛋白质并确定其分子量。常用于检测多种病毒如HIV的抗体或抗原。第九章免疫学应用免疫印迹法示意图第九章免疫学应用第二节淋巴细胞的测定检测各群体淋巴细胞的数量与功能是观察机体免疫状态的重要手段。外周血是病人主要的检测标本，但仅代表再循环的淋巴细胞。实验动物还可取胸腺、脾、淋巴结等作为标本进行检查。第九章免疫学应用第九章免疫学应用第九章免疫学应用第九章免疫学应用第九章

免疫学应用第九章免疫学应用第一节免疫学防治（一）人工自动免疫给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生特异性免疫力。免疫力出现较慢但持久，多用于预防。1、死疫苗：用物理、化学方法杀死病原微生物制备而成的疫苗。如伤寒、霍乱、百日咳等。2、活疫苗：通过毒力变异或人工选择法获得的减毒或无毒株。类似于轻症或隐性感染。如卡介苗、麻疹、风疹、脊灰疫苗。3、类毒素：外毒素经0.3%~0.4%甲醛处理后失去毒性但保持抗原性的生物制品。如白喉、破伤风类毒素。4、新型疫苗：亚单位疫苗、合成疫苗和基因工程疫苗。第九章免疫学应用（二）人工自动免疫的注意事项1、接种对象2、接种剂量、次数和间隔时间3、接种途径4、接种后反应5、禁忌症第九章免疫学应用二、免疫学治疗（一）人工被动免疫是给机体输入抗体，使机体获得特异性免疫力。维持时间短，一般2~3周，多用于紧急预防。如抗毒素、人丙种球蛋白、人特异性免疫球蛋白。（二）免疫增强剂是增强、促进和调节机体免疫功能的生物或非生物制剂。主要用于肿瘤、免疫缺陷病和传染病的辅助治疗。（三）过继免疫：分特异性和非特异性两种。（四）免疫抑制剂第九章免疫学应用第二节免疫学诊断

一、体液免疫检测（抗原或抗体的检测）抗原-抗体反应包括沉淀反应、凝集反应、溶解反应、补体结合反应和中和反应等。抗原-抗体反应可用已知的特异性抗体检测未知的抗原；也可用已知的抗原检测未知的抗体。免疫荧光技术、免疫酶技术、同位素标记技术、发光免疫分析等免疫标记技术提高了抗原抗体反应的敏感性。第九章免疫学应用抗原-抗体反应的特点?抗原-抗体的结合是特异性结合?抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合?抗原抗体反应可分为两个阶段特异性结合阶段可见的反应阶段?抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现象，于两者的分子比例密切相关第九章免疫学应用抗原抗体比例对反应现象的影响第九章免疫学应用抗原-抗体反应受多种因素影响1电解质：抗原-抗体反应通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液，以供给适应浓度的电解质。2温度：一般常使用反应在37度水浴或孵育箱中进行。3.酸碱度：抗原-抗体反应适应的酸碱度为PH6~8。抗原-抗体反应受多种因素影响第九章免疫学应用抗原抗体的检测方法凝集反应沉淀反应补体溶血反应和补体结合反应中和反应用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应第九章免疫学应用凝集反应

(Agglutination)细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象，称为凝聚反应。1、直接凝集：将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。又分