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吸收放散试验在输血科的应用
吸收放散试验的是应用特异性抗原与抗体的结合是可逆的这一
原理,用于检测红细胞表面存在的弱血型抗原,鉴定分离血清中可能
存在的混合抗体,辅助红细胞血型及混合抗体特异性的鉴定。对于临
床输血工作具有重要临床意义。现在介绍一下吸收放散试验的基本原
理,临床应用,操作技术及注意事项。
一、吸收放散试验的原理:
吸收试验的原理
抗原与抗体的结合是特异性的,含有抗体活性的血清加加入相应
抗原红细胞后,抗体的活性下降或消失,这种作用为吸收试验。对
一未知抗体可以用已知抗原进行吸收,吸收后抗体活性下降或消失,
说明未知抗体中含有与已知抗原相对应的抗体。当被检血清中含有多
种抗体时,可用已知抗原分别吸收用于鉴定抗体的特异性。
放散试验的原理
抗原与抗体的结合是可逆的,在物理条件改变时,抗体又会从抗
原抗体复合物上分离下来,将抗体由抗原抗体复合物上分离下来的试
验为放散试验。
二、吸收放散试验的临床应用
1.鉴定新生儿溶血病致敏患儿红细胞上的抗体
2.在溶血性贫血和可疑输血反应中,鉴定DAT阳性红细胞抗体
3.检测红细胞表面存在的弱血型抗原
4.鉴定、分离血清中可能存在的混合抗体
5.辅助红细胞血型及混合抗体特异性的鉴定
6.从DAT阳性红细胞上去除抗体
7.制备可用于自身吸收或鉴定血型的红细胞等
三、吸收试验方法
1.吸收试验的准备:
1).生理盐水洗涤压积红细胞至少3遍,最后一次洗涤后,彻底
倾去上清液
2).根据待检红细胞的特性(如怀疑是弱A抗原红细胞,则加入
1ml抗A;如怀疑是弱B抗原红细胞,则加入1ml抗B)将抗血清加
入洗涤过的压积红细胞中
2.吸收试验的操作:
1)冷吸收:一份盐水洗涤的已知抗原的压积红细胞,加一份被
检血清,混匀后置4°C冰箱吸收广2小时(ABO、MN、P血型系统等)
2)温吸收:一份盐水洗涤的已知抗原的压积红细胞,加一份被
检血清,混匀后置37°C水浴箱中吸收1小时(Rh血型系统等)
3)离心,去除所有上清试剂,将红细胞转移到另一干净试管中。
4)用较大体积(lOmL或更多)生理盐水洗涤红细胞至少8遍,
保存最后一遍洗涤离心后的上清液,用于检测是否残留游离抗体
5)吸收试验可用于区别真假凝集:真凝集经吸收后凝集减弱或
呈阴性;假凝集经吸收后凝集不变
6)如果吸收后血清仍有活性,证明抗体未被完全吸收
7)血清不反应,证明抗体被完全吸收
AB型:A型和B型均有强
洗涤完成后,可凝集或弱凝集可以证明红
取少量上清与相细胞上有A抗原和B抗原“
应红细胞反应、
无凝集1
放散试验原理,
四、放散试验的操作:
用放散试验技术将大量附着于红细胞上的抗体放散到小量的生
理盐水中,这种含有抗体的溶液为放散液。放散液中的抗体具有特
异性,可以与相应抗原结合,从而可以进一步确定抗体的特异性,常
用放散方法有热放散和酸放散
1、热放散法
热放散试验主要应用ABO血型系统新生儿溶血病及从红细胞上
洗脱掉IgM及IgG抗体。此方法制备抗体最容易,但抗体回收较差,
即如果抗体较弱,放散试验可得到假阴性的结果。优点是适用于一般
化验室,缺点是放散液中含有较多游离白蛋白。
1)将与压积红细胞等体积的生理盐水加入试管中,轻轻混匀红
细胞,置56°C水浴中10分钟,不时地轻摇试管,1000g离心3分钟,
上清液是否留用,应视实验目的而定。
2)通过DAT试验检测放散红细胞放散效果。DAT阴性,留取红
细胞待用;DAT阳性,重复以上步骤,直到DAT阴性为止。
3)热放散试验注意事项
鉴定
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