色谱分离过程最终版.ppt

*对理想检测器的要求高灵敏度；适用范围广，对所有组分都有响应；温度、流动相流速的变化对响应没有影响；可梯度洗脱，响应与流动相的组成无关；死体积小；使用方便、可靠、耐用；线性范围宽；响应时间快；常用检测器紫外检测器（UV）荧光检测器（FD）示差折光检测器（RID）蒸发光散射检测器（ELSD）紫外检测器（UV）配置最普遍；主要用于检测具有π-π、p–π共轭结构的化合物，如芳烃、稠环芳烃等；灵敏度高；可用于梯度洗脱缺点：只能检测有紫外吸收的样品；（衍生化解决）对流动相的选择有一定的限制；（截止波长）荧光检测器（FD）适用于能产生荧光的化合物；主要用于氨基酸、多环芳烃等样品；灵敏度极高（比紫外高1~3个数量级），适用于痕量分析；可梯度洗脱缺点：许多化合物不产生荧光（可衍生化解决）；示差折光检测器（RID）通用性好；对糖类分析灵敏度尚可；缺点：灵敏度低（比紫外低3个数量级）；不能梯度洗脱（否则，基线会漂移）蒸发光散射检测器（ELSD）20世纪90年代新开发；是示差折光检测器的理想替代品，对葡萄糖最小检出量5ng；高灵敏；可梯度洗脱；缺点：对有紫外吸收的样品，检测灵敏度较低；检测器比较紫外荧光示差折光蒸发光散射测量参数吸光度荧光强度折射率质量类型选择型选择型通用型通用型梯度洗脱可以可以不可以可以最小检出量约1ng约1pg约1μg0.1~10ngHPLC定性、定量分析定性分析利用保留值定性；色谱-光谱联用定性；利用馏分收集器收集后，再用光谱定性；定量分析归一化少用外标法内标法5.色谱分离的应用薄层色谱（TLC）高效液相色谱（HPLC）气相色谱法（GC）典型制备色谱GC：以气体（即载气）为流动相的柱色谱分离技术。GC中常用作的载气的气体有N2、He、H2、Ar，均为惰性气体。GC载气的功能仅仅是携带试样、洗脱组分。GC的选择性主要取决于固定相和组分分子间的作用，所以可通过改变固定相来改变GC的选择性。气相色谱仪-GC气相色谱仪流程（图）气路系统进样系统分离系统（色谱柱系统）检测系统数据处理和控制系统（含温控系统）样品进样汽化色谱柱分离检测器信号记录载气进样系统由进样器和气化室构成。液体样品—微量注射器气体样品—六通阀、微量注射器气化室温度：要保证样品瞬间、完全气化，一般高于沸点50℃以上，但也不宜太高，以防分解GC的特点1.优点分离效率高（填充柱上千块塔板）分析速度快样品用量少（检测限低，高灵敏检测器）2.缺点：（约20%样品适用）样品须能气化（350℃下有一定的挥发性）热稳定性要好定性困难柱温的选择柱温应低于固定液的最高使用温度；柱温过高，易造成固定液流失、检测器噪声变大、基线漂移。柱温一般选择接近或略高于组分的平均沸点。降低柱温可在一定程度内改善分离；升高柱温可加快分析速度。组分复杂，沸程宽（80-100℃）的试样，采用程序升温。对检测器的要求稳定性好、噪声低；灵敏度高；线性范围宽；死体积小，响应快噪声和漂移噪声（N）：在没有样品进入检测器时，基线在短期内发生的波动。噪声的来源：固定液的流失、载气的不纯，电子元件不稳定、温度变化、外磁场干扰等。基线漂移：基线在一定时间内产生的单向、缓慢移动。良好的检测器其噪声与漂移都应很小。HPLC与GC比较GC：适于能气化、热稳定性好的样品；约占有机物的20%；HPLC：不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的样品均可检测，约占有机物的80%。5.色谱分离的应用薄层色谱（TLC）高效液相色谱（HPLC）气相色谱法（GC）典型制备色谱典型制备色谱制备色谱是适应科技和生产需要发展起来的一种新型、高效、节能的分离技术，目前在工业生产中应用的色谱分离技术主要是中、高压液相色谱。由于新的高选择性能固定相的开发，新型色谱技术的出现，以及色谱机制、色谱柱放大效应理论及相关数学模型研究的不断深入，使色谱分离取得了长足的发展。同时新的概念如SMBC（模拟移动床色谱）、Pre-SFC（制备型超临界流体色谱）以及EBAC（扩展床吸附色谱）也被引入，大大扩展了色谱作为一种工业提纯工具的应用领域。模拟移动床色谱（SMB）SMB色谱是连续操作的色谱系统它由多根（大多为5~12根）色谱柱组成。每根柱子之