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临床输血检验技术
四项病原学标志物的酶免检测
学习目标
掌握输血相关传染病病原学标志物酶联免疫吸附试
验的原理、方法、结果判断、待查标本的处理原则。
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
采用双抗原夹心法和双抗体夹心法酶联免疫吸附试验原理，在
微孔条上预包被重组HIV抗原和抗P24单抗，配以生物素抗体、酶标
记抗原、酶标记亲和素及TMB显色剂等其它试剂，检测人血清或血
浆中的HIV-1型和（或）HIV-2型抗体和HIVP24抗原。
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
EDTA-K2真空采血管留取血液样本
手工加样仪、全自动加样及酶免处理系统、
人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒（酶
联免疫法）等
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
试剂的平衡检查试剂盒配制洗液检查微孔反应板
检测检查加样效果加样
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
结果判断
一种或两种可疑或反应性
无反应性单试剂待查双试剂待查
单试剂双孔复试双试剂单孔复试
阴性
一孔或两孔为两孔任一种试剂两种试剂
可疑或反应性均为无反应性为可疑或反应性均为无反应性
HIV阳性HIV阳性HIV阴性
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
HIV初筛阳性样本的送检
疫情上报人员填写HIV初筛阳性送检单
取阳性血清于专用试管、标识
填写HIV初筛阳性样本送检记录
样品放入专用套桶并放入专用保温箱
送确诊实验室
人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
【质量控制】
1．从冰箱中取出的试剂盒应至少在室温平衡
30min以上。
2．每次实验前试剂最多可添加试剂槽的3／4的量，
添加时应小心，防止试剂砰溅导致试剂污染。
3．整个实验过程中应严格遵守仪器和项目操作规
程进行操作，不得擅自离岗。
乙肝表面抗原检测
应用双抗体夹心酶联免疫吸附实验原理。在微孔板预包被纯
化乙肝表面抗体（抗-HBs），加入待检样本，同时加入酶标
记乙肝表面抗体（HBsAb-HRP）进行温育，样本中存在的乙
肝表面抗原（HBsAg）与包被抗体形成“包被抗体-抗原-酶
标抗体”复合物。洗板后加入显色剂，复合物上连接的HRP
催化显色剂反应，生成蓝色产物，终止反应后，变为黄色。
乙肝表面抗原检测
EDTA-K2真空采血管留取血液样本
手工加样仪、全自动加样及酶免处理系统、
人类乙肝表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）
等
乙肝表面抗原检测
操作
l同人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
结果判断
l同人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
质量控制
l同人类免疫缺陷病毒抗原/抗体检测
very
丙型肝炎病毒抗体检测
应用间接酶联免疫吸附实验原理，在微孔板预包被HCV抗原，加
入稀释液及待检样品进行温育，样品中存在的HCV抗体与包被抗
原形成“包被抗原-抗体”复合物，洗板去除不与包被抗原结合的
物质；加入酶标试剂，进行第二次温育，酶标二抗与“包被抗原-
抗体”复合物结合，形成“包被抗原-抗体-酶标二抗”复合物；
再次洗板后加入显色剂，复合物上连接的HRP催化显色剂反应，
生成蓝色产物，终止反应后，变为黄色。
丙型肝炎病毒抗体检测
EDTA-K2真空采血管留取血液样本
手工加样仪、全自动加样及酶免处理系统、
丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）
等
丙型肝炎病毒抗体检测
操作
l同人类免疫缺
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