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安捷伦1200,1260液相的使用2011.10.29

Contents结构1原理2操作3日常维护4

结构:Agilent1260infinity流动相四元泵自动进样器真空脱气机柱温箱检测器工作站注意：与1200Series相比，最大改变在于1260infinity四元泵与真空脱气机整合为一个模块；Purge阀的设计上也有些改变，后面会具体说明。MCGV

原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的性质（如：分配系数，亲和，分子大小），从而在两相中作相对运动时,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

操作1流动相准备：流动相都应新鲜配制并且过滤，上机前对流动相进行适当的脱气（如超声），以保证更好的在线脱气效果和在线混合效果。BCAD1200SeriesMCGV有四根管路，A、D管路在下端，B、C管路在上端。当有机相和盐溶液同时存在时，为防止高压析盐后堵塞管路，请确保下端管路为水相！（Purge阀)

操作2打开HPLC各模块电源按钮，在桌面双击“Online”图标，打开工作站。点击“启动”，开启各模块。首先设置溶剂瓶体积，一般比实际体积要少一些，防止溶剂走干后柱塞杆继续运转。选择“溶剂瓶填充量”

操作3排除管路气泡，置换管路中流动相：打开Purge阀，单击四元泵模块选择“设置泵”，流速设为5ml/min，将要处理的管路比例设为100%，点击“确定”清洗，排气5min。1260的Purge阀不能打开到最大位置，会造成漏液。选择“设置泵”当有含盐流动相时，还需设置Sealwash，用10%异丙醇清洗柱塞杆根据柱子耐受压和实际使用情况设置压力上限！

操作4装柱：色谱柱是有方向的，反接会可能导致柱效急剧下降！请按柱温箱管路流向和色谱柱标签所示流向接入。接入时确保Peek管与柱头之间无死体积，无空气进入柱子和系统。

操作6样品信息设置：多个样品序列运行

操作6数据处理：在桌面双击“Instrumentoffline”打开离线工作站，单击左下角“数据分析”进入分析界面。在此处可调出相应文件单击此处，调出“调用信号：仪器1”窗口

操作6数据处理：积分点击这里，调出“事件表”

维护除上述流动相要过滤后使用，Sealwash清洗柱塞杆外避免使用下述可腐蚀钢铁的溶剂：碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。防止堵塞溶剂过滤器在溶剂中加入0.0001－0.001M的叠氮化钠使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液建议不超过两天。处理：将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸（35％）的烧杯里浸一小时，再用水洗净，禁止超声（超声会破坏内部致密结构，使过滤效果失效甚至堵塞滤头）过滤白头的维护以纯水作流动相，将流速设为5mL/min，如果泵压超过10bar，则说明过滤白头需要更换了。清洗仪器各接口处析盐自动进样器针座的清洗定期用异丙醇对系统进行清洗检测器不宜平凡开关

谢谢！