种子的扩大培养.ppt

不同接种量影响菌体的生长和发酵第30页,共48页，星期六，2024年，5月发酵前期发酵液作为种子，发酵指数明显提高发酵后期菌体自溶明显，影响提炼收率第31页,共48页，星期六，2024年，5月20%种子罐＋10%发酵罐前期发酵液效果最好第32页,共48页，星期六，2024年，5月6、种龄指种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。种龄短：菌体太少；种龄长：易老化。原则：对数生长期末，细胞活力强，菌体浓度相对较大，但是最终由实验结果定。第33页,共48页，星期六，2024年，5月大量地接入培养成熟的菌种的优点：缩短生长过程的延缓期，因而缩短了发酵周期，提高了设备利用率节约发酵培养的动力消耗有利于减少染菌机会第34页,共48页，星期六，2024年，5月舒琴，林产化学与工业，2004镜检：24小时多个杆菌首位相连成线形，处于繁殖旺盛期30小时开始出现芽孢第35页,共48页，星期六，2024年，5月4.2影响种子质量的因素原材料质量培养温度湿度通气与搅拌斜面冷藏时间培养基pH第36页,共48页，星期六，2024年，5月原材料质量原材料质量波动引起种子质量不稳定原材料质量波动的主要原因：无机离子含量不同（微量元素Mg2+、Cu2+、Ba2+能刺激孢子的形成，磷含量太多或太少也会影响孢子的质量）。第37页,共48页，星期六，2024年，5月培养温度温度过低，菌种生长发育缓慢温度过高会使菌丝过早自溶在制备土霉素生产种子过程中，高于37℃培养时，孢子接入发酵罐后表现出糖代谢变慢，氨基氮回升提前，菌丝过早自溶，效价降低等现象。第38页,共48页，星期六，2024年，5月湿度湿度低，孢子生长快；湿度大，孢子生长慢制备土霉素生产菌种龟裂链霉菌孢子时发现，在含有少量水分的试管斜面培养基下部孢子长得较好，而斜面上部由于水分迅速蒸发呈干瘪状，孢子稀少第39页,共48页，星期六，2024年，5月通气与搅拌足够的通气量，以保证菌种代谢正常，提高种子的质量搅拌可提高通气效果，促进生长繁殖，过度搅拌导致培养液大量涌泡，液膜表面的酶易氧化变性，泡沫过多增加染菌机会，增加能耗。丝状微生物不宜剧烈搅拌。第40页,共48页，星期六，2024年，5月斜面冷藏时间对孢子的生产能力有较大影响冷藏时间越长，生产能力下降越多链霉素生产中，斜面孢子在6℃冷藏两个月后的发酵单位比冷藏一个月的降低18％，比冷藏3个月的降低35％。第41页,共48页，星期六，2024年，5月培养基培养种子的目的：扩大培养，增加细胞数量；同时也必须培养出强壮、健康、活性高的细胞。为了使细胞迅速进行分裂或菌丝快速生长。第42页,共48页，星期六，2024年，5月有较完全和丰富的营养物质，糖分少，需充足氮源和生长因子，无机氮源比例大；各种营养物质的浓度不必太高；供孢子用的种子培养基，可添加易被吸收利用的碳源和氮源；应考虑与发酵培养基的主要成分相近。种子培养基特点第43页,共48页，星期六，2024年，5月pH选择最适种子培养pH的原则是获得最大比生长速率和适当的菌量培养最后一级种子的培养基的pH应接近于发酵培养基的pH，以便种子能尽快适应新的环境第44页,共48页，星期六，2024年，5月种子质量的控制措施菌种稳定性的检查测定其生产能力，从中挑选高产菌株，并及时对退化菌种进行复壮提供适宜的生长环境种子无杂菌检查，保证纯种发酵。种子液生化分析项目主要有：营养基质的消耗速度、pH变化、溶氧变化、色泽和气味等第45页,共48页，星期六，2024年，5月三、种子质量标准1、细胞或菌体菌丝形态、菌丝浓度和培养液外观（色素、颗粒等）单细胞：菌体健壮、菌形一致、均匀整齐，有的还要求有一定的排列或形态；霉菌、放线菌：菌丝粗壮、对某些染料着色力强、生长旺盛、菌丝分枝情况和内含物情况好。第46页,共48页，星期六，2024年，5月在抗生素发酵中，产物生成量是考察种子质量的重要指标，因为种子液中产物生成量的多少间接反映种子的生产能力和成熟程度。3、产物生成量2、生化指标种子液的糖、氮、磷的含量和pH变化。4、酶活力种子液中某种酶的活力，与目的产物的产量有一定的关联。第47页,共48页，星期六，2024年，5月*感谢大家观看第48页,共48页，星期六，2024年，5月**操作简便，不易污染杂菌。生产青霉素的产黄青霉菌：采用大米或小米为固体培养基，取适量装入250mL茄子瓶中灭菌，接种，在25~28培养4~14天，产生孢子。不产孢子的细菌，产谷氨酸