紫外可见分光光度分析法.ppt

第六章

紫外-可见分光光度法6.4.1普通分光光度法6.4.2示差分光光度法6.4.3双波长分光光度法6.4.4导数分光光度法6.4.1普通分光光度法6.4.2示差分光光度法示差分光光度法（示差法）示差法标尺扩展原理：6.4.3双波长分光光度法关键问题:选择波长组合λ1、λ2的基本要求6.4.4导数分光光度法导数分光光度法请选择内容：第四节

分光光度

定量测定方法1.单组分的测定通常采用A–c标准曲线法定量测定。2.多组分的同时测定⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。Aλ1=κaλ1bca＋κbλ1bcbAλ2=κaλ2bca＋κbλ2bcb普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差，需采用示差法，即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。为什么呢？设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cscx)。则Ax=κbcxAs=κbcsΔＡ＝Ａx－Ａs=κb(cx－cs）=κbΔc测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔＡ。ΔA＝Ax－As=κb(cx－cs）=κbΔc测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔA。示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cxcx=cs+Δc示差法是如何提高测量准确性的呢？普通法：cs的T=10%；cx的T=5%示差法：cs做参比，调T=100%则：cx的T=50%；标尺扩展10倍不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸光度Aλ1作为参比，消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。ΔA＝Aλ2－Aλ1＝(κλ2－κλ1)bc两波长处测得的吸光度差值ΔA与待测组分浓度成正比。κλ1和κλ2分别表示待测组分在λ1和λ2处的摩尔吸收系数。测量波长λ2和参比波长λ1的选择与组合以两组分x和y的双波长法测定为例：设：x为待测组分，y为干扰组分，二者的吸光度差分别为ΔAx和ΔAy，则该体系的总吸光度差ΔAx+y为ΔAx+y=ΔAx+ΔAy如何才能使ΔAy=0？以消除干扰？如何选择波长λ1、λ2有一定的要求。⑴选定的波长λ1和λ2处干扰组分应具有相同吸光度，即可采用作图法选择符合上述两个条件的波长组合。⑵在选定的两个波长λ1和λ2处待测组分的吸光度应具有足够大的差值。故此时，测得的吸光度差ΔA只与待测组分x的浓度呈线性关系，而与干扰组分y无关。若x为干扰组分，则也可用同样的方法测定y组分。导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。利用吸光度(或透光度)对波长的导数曲线来进行分析：Ｉ＝Ｉ0e-κbc假定入射光强度Ｉ0在整个波长范围内保持恒定：dI0/dλ＝0则dI/dλ＝-Ｉ0bcdκ/dλdI/dλ＝－Ｉ0bcdκ/dλ基本吸收曲线及1阶到4阶导数曲线示意图（a）基本吸收曲线及1阶到4阶导数（b）两个不等高曲线叠加（c）叠加的基本吸收曲线及1阶到4阶导数一阶导数信号与试样浓度呈线性关系；基本曲线的拐点在奇阶导数中产生极值而在偶阶导数中通过零点。基本曲线随着导数阶数的增加，由微分产生的谱峰数目增加（n阶微分产生n+1个峰，即出现精细结构）而宽度变小（信号变尖锐，使分辨能力增加）。结束6.1基本原理6.2紫外-可见分光光度计6.3显色与测量条件的选择6.4分光光度定量测定