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第一章血液检查
掌握要点:
1、抗凝剂的应用选择
2、血涂片的制备和瑞氏染色
3、外周血白细胞分类和常见异常细胞的识别〔重点〕
4、三分类血球计数仪的工作原理和主要参数〔重点〕
5、血细胞直方图的特点、分析和临床应用〔重点〕
6、血细胞计数仪使用的本卷须知〔重点〕
7、血细胞检测的主要临床意义;第一节血液一般常规检查
一、标本采集及抗凝剂应用
血液标本的采集可分为毛细血管采血法和静脉采血法。需血量较少的工程和检测方法可以用毛细血管采血法。自动血细胞分析仪需血量较多,提倡用静脉采用法。毛细血管和静脉之间,无论细胞成分和化学组成都存在一定程度的差异,在分析和比较结果时应予以考虑。需要作准确的测定时必须用静脉采血方法。;EDTA二钾是血液常规检查最常用的抗凝剂,常用量为1.5~2.2mg/ml血液,此抗凝剂不影响白细胞的数量和大小,对于红细胞影响也很小,且可以抑制血小板聚集,故用于血细胞计数和形态分析。但它不适用于作凝血因子和血小板功能试验。需要注意的是有个别病人的血小板对EDTA抗凝剂有抵抗作用,可以造成局部血小板聚集,引起血小板计数假性减低,这种病人的标本需要用枸橼酸钠作为抗凝剂才能得到准确的血小板计数结果。;根据ICSH1993年文件建议:血细胞计数同EDTA-K2作抗凝剂,用量为EDTA-K2-2H2血液。但是EDTA影响血小板聚集,不适合于作凝血象检查和血小板功能试验。
;枸橼酸钠:对凝血V因子有较好的保护作用,故常用于凝血功能检查。红细胞沉降率测定也采用此抗凝剂,但与前者采用不同的浓度。
取血一定严格按照比例进行,取血后要上下颠倒试管8次,以使抗凝剂与血液充分混合,到达抗凝目的。
;肝素:因其有使血小板趋向聚集的作用,不适用于血细胞的常规检查。由于肝素可引起白细胞聚集,并使血涂片在罗氏染色时产生蓝色背景,所以肝素抗凝血不适合血液学一般检查。肝素抗凝主要用于血气分析、红细胞脆性试验、血液流变学检查及生化检查。
;表1不同颜色帽的真空采血管应用范围
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颜???抗凝剂应用范围
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灰草酸盐,氟化钠全血、血浆,抑制糖原分解的酶
黄别离胶血清,主要用于生化和免疫学检查
绿肝素全血、血浆,主要用于血气分析
红不含别离胶血清,主要用于生化和免疫学检查
蓝拘橼酸钠血浆,主要用于凝血纤溶和血小板聚集试验
紫乙二胺四乙酸盐全血、血浆,主要用于血细胞检查
------------------------------------------------------------------------------------;二、目测计数法
〔一〕原理
将采集的血液标本参加一定量的稀释液中,〔如计数白细胞,还应参加一定量的溶血剂,将红细胞破坏。以便计数白细胞;如计数血小板可参加溶血剂破坏红细胞,也可不参加溶血剂,直接计数〕滴入计数盘,按一定操作规那么计数上述三种不同的血细胞,然后再按一定的计算公式计算出每升血液中的细胞数量;〔二〕试剂,包括:
红细胞稀释液〔Hayem液〕,甲醛拘橼酸盐稀释液和生理盐水〕,白细胞稀释液〔主要成分是冰醋酸〕,血小板稀释液〔草酸铵溶液和复方尿素液,均为溶血法,直接计数〕。如何配制可参看操作规程手册。;〔三〕器材,主要有
一次性采血针,一次性微量〔10?l和20?l〕毛细采血管,血细胞计数盘和普通光学显微镜。;〔四〕操作,要点如下:
1、正确选择采血部位
2、消毒
3、穿刺〔一针见血〕
4、第一血弃去
5、毛细管采血〔没有气泡,不能凝集〕
6、稀释、加样、计数;〔五〕计数误差
血细胞的计数误差可分为技术误差和固有误差。
1、技术误差
由于操作不正规和仪器不精确造成的误差称为技术误差。这类误差通过主观努力,即可防止或逐渐缩小。常见技术误差如下:;〔1〕取血部位不当。局部
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