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中国应用生理学杂志,2020,36(3)211
过表达miR31对结肠炎模型小鼠TLR4/NFB信号通路及
κ
凋亡蛋白的调控
刘凯丽,都新新,张文琴,吴亚俐,王茜,王春芳,崔香丽△
(山西医科大学生理学系,太原030001)
【摘要】目的:探讨miR31对DSS诱发结肠炎小鼠TLR4/NFB信号通路和凋亡相关蛋白的影响。方法:小
κ①
鼠结肠炎实验:用1%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱发小鼠溃疡性结肠炎(UC)。14只FVB非转基因小鼠随机分为control
===+
组(n6),DSS组(n8),16只FVBmiR31转基因小鼠随机分为miR31过表达组(n8),miR31过表达DSS组
=+
(n8),DSS溶于水后通过饮水给予小鼠。DSS组和miR31DSS组第一周饮用1%DSS水,第二周饮用正常无菌
水,第三周饮用1%DSS水,如此5周后造模完成,之后留取小鼠的结肠组织,通过Westernblot和IHC检测小鼠结
肠组织NFBp65、TLR4、Bax、Bcl2蛋白的表达;TUNEL检测小鼠结肠组织细胞凋亡。细胞培养实验:在人结肠
κ②
上皮细胞系HCT116细胞中通过脂质体转染的方法转染miR31mmiic和inhibitor,使miR31过表达或敲低,每组
均进行三次重复,48h后收取细胞,通过Westernblot检测NFBp65、TLR4蛋白的表达。结果:动物实验中,与
κ①
control组相比,小鼠结肠组织中DSS组和miR31过表达组NFBp65、TLR4蛋白表达水平和凋亡细胞指数均显著
κ
+
升高(P<0.05或P<0.01),Bcl2/Bax比值显著降低(P<0.05或P<0.01);且与DSS组相比,miR31DSS组NFB
κ
p65、TLR4蛋白表达水平和凋亡细胞指数也显著升高(P<0.01),Bcl2/Bax比值显著降低(P<0.01)。②细胞实验
中,与control组相比,HCT116细胞过表达miR31组的NFBp65、TLR4蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<
κ
0.01),敲低miR31组的NFBp65、TLR4蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:miR31通过促进TLR4/NFB信
κ
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