过表达miR-31对结肠炎模型小鼠TLR4NF-κB信号通路及凋亡蛋白的调控.pdfVIP

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中国应用生理学杂志,2020,36(3)211

过表达miR31对结肠炎模型小鼠TLR4/NFB信号通路及

κ

凋亡蛋白的调控

刘凯丽,都新新,张文琴,吴亚俐,王茜,王春芳,崔香丽△

(山西医科大学生理学系,太原030001)

【摘要】目的:探讨miR31对DSS诱发结肠炎小鼠TLR4/NFB信号通路和凋亡相关蛋白的影响。方法:小

κ①

鼠结肠炎实验:用1%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱发小鼠溃疡性结肠炎(UC)。14只FVB非转基因小鼠随机分为control

===+

组(n6),DSS组(n8),16只FVBmiR31转基因小鼠随机分为miR31过表达组(n8),miR31过表达DSS组

=+

(n8),DSS溶于水后通过饮水给予小鼠。DSS组和miR31DSS组第一周饮用1%DSS水,第二周饮用正常无菌

水,第三周饮用1%DSS水,如此5周后造模完成,之后留取小鼠的结肠组织,通过Westernblot和IHC检测小鼠结

肠组织NFBp65、TLR4、Bax、Bcl2蛋白的表达;TUNEL检测小鼠结肠组织细胞凋亡。细胞培养实验:在人结肠

κ②

上皮细胞系HCT116细胞中通过脂质体转染的方法转染miR31mmiic和inhibitor,使miR31过表达或敲低,每组

均进行三次重复,48h后收取细胞,通过Westernblot检测NFBp65、TLR4蛋白的表达。结果:动物实验中,与

κ①

control组相比,小鼠结肠组织中DSS组和miR31过表达组NFBp65、TLR4蛋白表达水平和凋亡细胞指数均显著

κ

升高(P<0.05或P<0.01),Bcl2/Bax比值显著降低(P<0.05或P<0.01);且与DSS组相比,miR31DSS组NFB

κ

p65、TLR4蛋白表达水平和凋亡细胞指数也显著升高(P<0.01),Bcl2/Bax比值显著降低(P<0.01)。②细胞实验

中,与control组相比,HCT116细胞过表达miR31组的NFBp65、TLR4蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<

κ

0.01),敲低miR31组的NFBp65、TLR4蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:miR31通过促进TLR4/NFB信

κ

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