菌落总数测定操作步骤.pdf

食品中菌落总数测定操作步驴

器四、药品试剂准备

浴锅水位，通电，设定为46度，加热

解;

生理盐水于三角瓶中，用10至升刻度吸管分别量取9至升上述〈第3步所培溶液)生

理盐水十二支试管中，用透气塞尸棉塞封巾，放入高压灭菌锅;

或纸封口，放入高正灭菌锅，

观察正力表指针变化，从压力表指针达121度时开始计时，使温度保持121度15分钟

《根据不同的型号需手动或自动控制)，15分钟后断电，上自然冷却使压力表指针回到零

位。

样品稀释和培养

打开超净工作台风机;

打开压力锅盖，取出包庄严密的8套直径90毫米的堵养四，放入超净上作台;

取出装有225毫升生理盐水和200毫天培养基的二角瓶〈保持封由密闭)、编号-1，放

入恒温在46度的水浴锅中;

取出装有9毫升生理盐水的支试管《置十试管架上)，分别纲号-2、-3、K，效入超冶工

作台;

取出包训严密的6文刻度吸管，放入超净工作台，

无菌操作称取25克样品,十超净二作人台中放入装有225毫升无茵生理盐水的二角瓶中，

用均质器处理1至2分钟，配成-1的阳平均液;

用1毫升灭此刻度吸管从-1样品均液中量取1毫升放入-2试管，混勾，制成1100的

样品均液，

用!毫升火菌刻度吸管从-2样训均液中量取!毫升放入-3试管，混匀，制成1:1000

的样品均液，

打开培养四和包裴物，培养焉分别山号1100、1:，1000、1;，10000、空白(各2亚);

菌落计数

用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计

数以曾落形成单位〈colony-formingunits,CFU)表示。

1、选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无芝延菌落生长的平板计数菌落总数。低于

30CFU的平板记录其体菌落数，大于300CFU的可记针为多不可计。每个稀释度的

凋落数应采用两个平板的平均数。

2、共中-个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板

作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很

均匀，即可计算半个平板后鳅以2，代表一个平板菌落数。

3、当平板上出现菌落问无明显界限的链状生长时，则将每条站链作为-个菌落计数。

4、若只有一个稀妊度平板上的请落数在适宜计数范围内，计算两个平板疯洲数的平均

值，再将平均值乘以机应稀释倍数，作为每gs(mL)样品中菌落总数结果。

5、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式〈1)计算:

示例:

|稀释度|4，100(第一稀释度)|1，1000(第二多释度)

|菌落数〈CFU)|232，244|33，355

N=二C/(nl+0.ln2)d