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乙肝病毒检测——方法学评价乙肝病毒结构HBsAg:是HBV感染的主要标志01HBsAb:保护性抗体02HBcAg:仅存于感染的肝细胞核内,03一般不存在于血循环中04HBcAb:非保护性抗体,HBcAb-IgM05提示HBV处于复制状态06HBeAg:HBV复制及强感染性的指标07HBeAb:有一定的保护作用,预后良好08(一)乙型肝炎病毒结构特点1大球型颗粒,又称Dane颗粒;小球型颗粒;管型颗粒2小球型颗粒;管型颗粒3管型颗粒患者血清中存在三种基本形态血清学检查生化学检查HBVDNA、基因型和变异检查乙型肝炎病毒的实验室诊断项目:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBcIgM方法ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay,最常用,定性)血清学检查HBsAg–感染的标志1Anti-HBs–既往感染/接种疫苗2Anti-HBcIgM–急性感染标志3Anti-HBcIgG–既往或慢性感染4HBeAg–急性病毒复制,有传染性5Anti-HBe–病毒不再复制6HBV-DNA–急性病毒复制,比HBeAg更准确;主要用于监测治疗反应7HBV血清学标志物的临床意义感染模式HBsAgHBeAgHBc(IgM)抗HBc(IgG)抗HBe抗HBs临床意义1+-----急性乙肝潜伏期后期,携带者。2++----急性乙肝早期或潜伏期3+++---急性乙肝早期4++-++--急性乙肝后期5++-+----急性或慢性乙肝,有HBV复制6+++-+-+-急性或慢性乙肝。急性期或无症状携带者7+-+-++-阴性慢性乙肝8+---+-慢性乙肝,无或低度HBV复制,乙肝恢复期,既往感染,隐匿性9---+-+乙肝恢复期,既往感染,隐匿性10-----+慢性乙肝,接种过乙肝疫苗。—乙型肝炎的诊断—判断传染性—判断预后—筛查献血员—流行病学调查两对半的意义乙肝三系定性检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查,对患者病情程度的评估参考性不大,所以乙肝患者在做乙肝三系定性检查的时候,应结合肝功能检查、乙肝病毒DNA检查、B超检查等来判定病情的轻重,ELISA法受其自身敏感性和特异性的限制;01HBVS和前C基因区出现位点突变导致HBsAg和HBeAg表达缺陷。02影响因素多,如加样时间,试剂平衡时间,样本溶血程度等等。特别是低浓度样本易导致假阴性结果,使弱阳性样本漏检。03急性感染的窗口期;HBsAg检测方法灵敏度不足;血清亚型的漏检等。04标本中病毒颗粒少;05ELISA检测灵敏低的原因及局限HBV具有“检测窗口期01假阴性结果02无法检测突变株及抗体03血清学检测的局限性01乙肝表面抗原(HBsAg)定量检测:02参考值:0-0.05IU/mL03临床意义:04可作为HBV携带者乙肝病毒复制的参考指标05评价拉美呋定的治疗效果06监测应用alpha-干扰素治疗病人的乙肝病毒复制07确定肝移植病人免疫球蛋白的使用剂量乙肝病毒的定量检测2.乙肝表面抗体(抗-HBs)定量测定:是HBsAg刺激机体产生的特异性抗体,是一种保护性抗体,能中和HBV。抗-HBs含量在0-10mIU/ml,表示不具有保护性,需要注射乙肝疫苗(3针:0-1-6方案)。抗-HBs含量在10-100mIU/ml,表示具有保护性,但较弱,需要乙肝疫苗强化注射(1针)。抗-HBs含量大于100mIU/ml,表示具有很强的保护性,不需要注射乙肝疫苗。乙肝病毒e抗原(HBeAg)乙肝病毒e抗体(抗-HBe)抗-HBe阳性说明病毒复制减少,传染性弱,但并非没有传染性。抗HBe不是保护性抗体。HBeAg增高说明病毒复制,具有很强的传染性。乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)抗-HBc:不是中和抗体,有IgG和IgM两种形式。IgM在早期出现,而IgG在恢复期出现,可持续多年或终身存在。由于乙肝病毒容易发生变异,再加上乙肝定性检测方法的局限性,会出现假阴性结果,导致不能及时发现乙肝的感染,也就不能得到及时的治疗,对医护人员和其他患者也存在着被感染的威胁。01乙肝五项定
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