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29卷,第4期光谱学与光谱分析Vol129,No14,pp1093-1099
2009年4月SpectroscopyandSpectralAnalysisApril,2009
羟基和超氧自由基的检测研究进展
张昊,任发政*
中国农业大学食品科学与营养工程学院,教育部-北京市功能乳品实验室,北京100083
摘要活细胞在必需的新陈代谢过程中会产生自由基,越来越多的研究证据表明,这些自由基涉及到许
多体内调控系统,然而一旦有过多的自由基生成便会氧化细胞脂膜、蛋白质、DNA和酶,进而对细胞造成
致命性的损伤。此外,研究还表明许多疾病与自由基密切相关,例如,有研究报道海氏默症病人脑中生物分
子的氧化损伤程度明显高于正常值,另外癌症可能也是DNA受到氧化损伤的结果。因此,测定自由基的方
法就显得十分必需和重要。文章重点对羟基和超氧自由基检测技术的发展情况进行了讨论,涉及的自由基
检测技术主要有分光光度法、荧光法、化学发光法和电子自旋共振技术,并评价了各种方法的优缺点。
关键词羟基自由基;超氧自由基;检测技术;评述
中图分类号:O65713文献标识码:ADOI:1013964/j1issn11000-0593(2009)04-1093-07
羟基苯甲酸,用其在510nm处的吸光度值表示OH#的多
引言少,吸光度值与OH#的量成正比[1]。
11112铁氧化邻二氮菲法
羟基自由基(OH#)和超氧自由基(O#)是生物体内2+
-Fenton反应产生OH#,羟自由基使邻二氮菲-Fe氧
2
#经一系列反应最终会3+2+
活性氧代谢产生的物质,其中O-化为邻二氮菲-Fe,使邻二氮菲-Fe在536nm处的最大
2
生成OH#,而OH#是一种氧化性很强的自由基,可以引吸收峰消失。根据536nm处吸光度变化判断受试物清除
发不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应,使糖类、蛋白质、核OH#的能力。需要注意的是,测定时加样方法对结果有重
酸及脂类等发生氧化损伤。研究表明肿瘤、心血管、衰老等要影响,需先将邻二氮菲、PBS及水混匀,并且每管加入
许多疾病与自由基相关。FeSO后立即混匀,否则会使局部颜色过浓,影响结果的重
4
因此,近些年
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