免疫细胞及其功能检验技术(免疫学检验课件).pptx

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;免疫细胞是指参与免疫应答或与免疫应答相关的细胞,主要包括淋巴细胞、单核-巨噬细胞和树突状细胞等。

通过分离、纯化免疫细胞及其亚群,并对其数量和功能测定,可以判断机体免疫功能状态,对指导临床实践和科学研究具有重要意义。;免疫细胞的分离与纯化;一、白细胞的分离;(二)高分子聚合物沉降法;二、外周血单个核细胞的分离;细胞种类;(一)Ficoll分离法;(二)Percoll分层液法;三、淋巴细胞的纯化及亚群的分离;(一)淋巴细胞的纯化;(二)淋巴细胞亚群的分离;尼龙棉分离法;免疫磁珠分离法;流式细胞术分离法;四、吞噬细胞的分离;(一)单核细胞的分离;(二)巨噬细胞的分离;(三)中性粒细胞的分离;;一、中性粒细胞功能检测;体内实验法--皮肤窗口法;体外法--Boyden小室法;体外法--琼脂糖平板法;将细胞悬液与金黄色葡萄球菌或白色念珠菌悬液混合,温育后涂片、固定和染色。在油镜下观察中性粒细胞对细菌的吞噬情况,计数100个细胞中吞噬和未吞噬细菌的中性粒细胞数,并记录吞噬的细菌数。;(三)中性粒细胞杀伤功能检测;二、巨噬细胞功能检测;正常小鼠肝中库普弗细胞可吞噬清除90%炭粒,脾巨噬细胞约吞噬清除10%炭粒。据此给小鼠静脉注射定量印度墨汁(炭粒悬液),间隔一定时间反复取静脉血,测定血中炭粒的浓度,根据血流中炭粒被廓清的速度,判断巨噬细胞的功能。;(二)巨噬细胞吞噬功能检测;小结

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