免疫学检验技术—超敏反应性疾病免疫学检验.pptx

;;;前言;第一节激发试验;激发试验（provocationtest）模拟自然发病条件，用少量变应原引起一次较轻的超敏反应发作，达到确定或排除变应原的一种体内试验。;二、皮肤激发试验;速发型皮肤试验结果判定：

阳性反应以风团为主；

点刺试验的阳性反应以红晕为主

迟发型皮肤试验结果判定

阳性结果以红肿和硬结为主。;分级;反应程度;假阴性出现的常见原因：

试验抗原的浓度过低或者抗原失效

患者皮肤反应差，或者试验前服用免疫抑制剂或抗组胺药物

操作误差

时间选择不当;假阳性出现的常见原因：

试验抗原不纯

试验溶液非特异性刺激；

皮肤反应性过强

手法过重或操作不当;（四）应用与评价;测定支气管吸入某种刺激性物质后产生收缩反应程度的方法，亦称气道反应性测定

吸入一定量的激发物

比较吸入前后肺通气功能指标

判断气道高反应性程度;特异性BPT将一定浓度的抗原刺激物装入雾化器中使受试者口或鼻吸入雾化颗粒，其携带激发物在支气管树及肺泡沉积而起作用

非特异性BPT将一定浓度的激发物装入雾化器中，进行同特异性BPT的操作

吸气流速、雾化颗粒直径的大小及气道通畅与否均可影响雾化颗粒在气道的沉积，从而影响气道的反应性;支气管反应有三种类型：速发、迟发和双重反应。每次观察不能小于24小时

测定指标

FEV1：重复性好，结果稳定；

PEF：峰流速仪价格低廉、方便、不受场地限制，与FEV1有较好的相关性，适合流行病学调查

sGaw：敏感性好，但重复性稍差;定性判断：

变应性的确定常以定性实验判断结果。

1.阳性：气道反应性增高

FEV1、PEF较基础下降≥20%或sGaw下降≥35%，有时伴有明显自觉症状或肺部闻及哮鸣音。;定性判断

2.阴性：气道反应性正常

FEV1、PEF或sGsw＜以上标准，正常值为阴性

无论激发试验阳性或阴性，均应排除气道反应性的影响因素。可疑者，间隔2～3周后复检或2个月后再测;禁忌证

有心或肺功能不全、高血压、甲亢、妊娠等

严重咽喉炎，呼吸道感染或肺炎者

一周内有呼吸道感染、预防接种、职业性过敏因素的接触等

有过敏性休克、严重的血管性水肿及严重的喉头水肿病史者

呼吸功能严重受损，基础PEF或FEV1值少于预计值70%者

身体极度虚弱,不能耐受本试验者;注意事项

详询病史，排除禁忌症，避免药物干扰

基础FEV1占预计值70%以上才能进行试验

受试者应为哮喘患者病情稳定时或缓解期

吸入激发物的浓度应从小到大，逐渐递增

应备有急救器械、药品和有经验的临床医生在场;（四）应用与评价;排除性饮食1周后，食物激发试验在医院内进行

排除的可疑食物以普通形式从不引起症状的小量开始，观察一段时间(结合病史确定观察时间)

若无症状，则将食物逐渐加至常量，院内观察2小时，监测呼吸、心率及皮肤改变

无症状者回家继续该试验，电话随访2～4天，若出现反应则来医院证实;五、其他激发试验;第二节血清lgE检测;一、血清tlgE检测;（二）临床意义;一、血清slgE检测;

;特异性变应原加入待检血清;（二）临床意义;第三节免疫复合物检测;一、基本概念;;二、抗原非特异性CIC检测技术;CIC的检测方法：按抗体分子在结合抗原后发生的物理学和生物学特性的改变而设计，主要方法：

PEG比浊法

ELISA法

Raji细胞法

抗球蛋白技术—mRF凝胶扩散试验

;以ELISA法为例;灵敏度高于PEG比浊法，可检测到0.1μg/mL

重复性好，相对稳定；

C1q制品不易精制,纯品不稳定，只能检出与补体结合的CIC;三、CIC检测方法评价及应用;常用免疫組化技术

如荧光免疫组化技术检测标本组织中的Ig和补体，荧光显微镜下观察荧光染色的IC沉积物的分布和性质

了解受累组织的成分、构型和特定部位

评估疾病的严重程度和治疗方案;类型;药物超敏反应研究切入点以组胺为代表的介质释放检测

常以嗜碱性粒细胞为观察模型

变应原刺激剂致嗜碱粒细胞释放组胺，可以检测出嗜碱性粒细胞的释放能力，变应原刺激剂可以特异性确定变应原的类型;BHRT是变应原刺激剂刺激纯化、洗涤后的嗜碱性粒细胞悬液而后释放化学介质组胺，通过测定组胺的量来反映嗜碱性粒细胞的释放能力

BHRT的结果可以从细胞释放一定量的组胺所需要的

变应原浓度或在一定浓度的变应原作用下细胞所释放

定量的组胺量来表达

实验的灵敏度高，结果可靠，但价格较高;(humanbasophildegranulationtest，HBDT);体内激发试验和体外抗体及释放介质检测，有助于明确超敏反应变应原辅助诊疗。

体内激发试验存在风险，优势在于可以综合反映体内免疫状态，可信度大

体外试