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第五章诊断酶学
第一节概述通过本节学习,掌握的知识点1、酶的组成、结构及功能特点。2、酶的催化机制。3、什么是同工酶,LDH、CK等同工酶的分布及临床意义。4、何谓工具酶,工具酶参与的指示反应。5、终点法和动力学法测定代谢物浓度的原理及区别。
第一节概述一、酶的概念与特征(一)、酶的概念:酶是活细胞分泌产生的具有催化活性的蛋白质或RNA。
第一节概述(二)酶的组成及功能按照酶的分子组成:单纯酶:酶蛋白结合酶:金属离子辅助因子小分子有机化合物
第一节概述(三)、酶的催化作用机制1、酶的活性中心:酶分子中能和底物特异性结合并将底物转化为产物的区域称为酶的活性中心。
第一节概述2、诱导契合学说在酶促反应中,酶与底物结合时,底物首先和酶分子上的活性中心相结合,形成酶-底物中间复合物(ES)。在构象上相互诱导,致使活性中心与底物完全紧密结合,这一过程称为诱导契合学说。
第一节概述(四)酶促反应动力学1、底物浓度对酶促反应速度的影响2、酶的浓度对酶促反应速度的影响3、温度、PH、激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。
第一节概述二、同工酶的概念与特征1、概念指催化相同的化学反应,但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
第一节概述二、同工酶的概念与特征3、临床常见的同工酶(1)LDH:该酶是四聚体酶,由两种亚基类型即骨骼肌型(M)和心肌型(H)。种类:LDH1,LDH2,LDH3,LDH4,LDH5。主要分布于心肌,红细胞,骨骼肌和肝脏中。
第一节概述二、同工酶的概念与特征3、临床常见的同工酶(2)CK——肌酸激酶该酶是二聚体酶,有两种亚基类型即骨骼肌型(M)和脑型(B)。该酶有三种:CK1—脑中CK2—心肌CK3—骨骼肌
第一节概述二、同工酶的概念与特征3、人体重要的同工酶(2)CK——肌酸激酶CK肌酸+ATP磷酸肌酸+ADP血清中CK2的活性测定有助于心肌梗死的早期诊断。
第一节概述三、工具酶(一)定义:酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。
第一节概述三、工具酶(二)工具酶参与的指示反应1、利用特异性较高的氧化酶产生过氧化氢,再通过加氧化发色剂进行比色的方法
第一节概述三、工具酶(二)工具酶参与的指示反应例:多胺氧化酶多胺氨基酸+H2O2+NH3+H2O2和4-AAP(氨基安替比林)显色反应。
第一节概述三、工具酶(二)工具酶参与的指示反应2、NAD(P)H在340nm具有特征性光吸收,NAD(P)+在340nm处不具有特征性光吸收,利用氧化-还原酶反应使其连接到NAD(P)+/NAD(P)H正/逆反应中,通过该两种物质量的变化间接反应待测酶的活性。
第一节概述三、工具酶(二)工具酶参与的指示反应例:己糖激酶法测定血清中葡萄糖浓度己糖激酶葡萄糖+ATP6-磷酸葡萄糖+ADP6-磷酸葡萄糖脱氢酶6-磷酸葡萄糖6-磷酸葡萄糖酸NADP+NADP
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