细胞因子(免疫学检验课件).pptx

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细胞因子;免疫系统:产生免疫功能的物质基础;细胞因子;一、理化特性:

多为小分子(8~30KD)蛋白或糖蛋白,多以单体形式存在,少数为二聚体(IL-10、IL-12等)或三聚体(TNF)。;(二)多向性:一种细胞可产生多种细胞因子,几种不同类型细胞也可产生一种或几种相同的细胞因子。;四、作用特点:

(一)高效性:只需极少量(pmol/L水平)细胞因子就能产生明显的生物学效应;;(四)拮抗性:一种细胞因子可以抑制另一种细胞因子的某种生物学作用。如:IL-4IFN-γ;(五)协同性:一种细胞因子可以增强另一种细胞因子的功能;;(七)非特异性:细胞因子以非特异性方式发挥作用,不受MHC限制,细胞因子必须与相应受体结合才能发挥效应;;一、根据细胞因子的来源分类

由单核细胞产生的细胞因子称为单核因子(monokine,MK);由淋巴细胞产生的细胞因子称为淋巴因子(lymphokine,LK)。

二、依据细胞因子的生物学功能分类

可分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、生长因子和趋化因子等六大类。;(一)白细胞介素(interleukin,IL)

白细胞介素即是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用,此外它们还参与机体的多种生理及病理反应。

(二)肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF):TNF-α、β(分别由单核-巨噬细胞、T细胞产生)

生物学效应:1.抗肿瘤作用

2.抗病毒作用

3.免疫调节作用

4.促炎症因子

5.致热作用

6.恶病质;(三)干扰素(interferon,IFN)由病毒或干扰素诱生剂刺激机体细胞产生的一种具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等功能的小分子多肽。

I型IFN-α

IFN-β抗病毒、抗肿瘤

II型IFN-r免疫调节

(四)集落刺激因子(colony-stimulatingfactor,CSF):G-CSF、M-CSF、GM-CSF、SCF、EPO、TPO等。

(五)趋化因子(chemokine):促进淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞等到达炎症部位并激活。

(六)生长因子(growthfactor,GF):TGF-β、EGF、NGF、VEGF、FGF等。;各类细胞因子在造血过程中的??用;二、介导炎症反应;细胞因子对Th1和Th2细胞分化的调节作用;1.细胞因子及受体缺陷

2.细胞因子过高表达

3.可溶性受体水平升高

;二、细胞因子与疾病的诊断;A.细胞因子补充疗法

B.细胞因子阻断疗法

;例:

IL-10:类风湿性关节炎;

EPO:血细胞减少症

IL-1、IFN:多种肿瘤。

;第四节细胞因子相关检验技术;(一)细胞增殖测定法

以细胞因子依赖性细胞株为靶向,通过观察特定的细胞因子刺激依赖性细胞株的增殖,来评估细胞因子的活性水平。

检测细胞增殖的常用方法有3H-TdR掺入法、比色法、染色法和直接计数法等。;;通过检测细胞DNA合成的增加或减少来判断细胞增殖的方法。在细胞的增殖过程中,DNA合成的增加使得指示细胞对核苷或碱基的需求增多,若将核苷标记上可以示踪的同位素(3H/125I),通过检测细胞内的同位素含量,则可反映细胞增殖的程度。;(二)细胞毒活性测定

对指示细胞具有破坏作用的细胞因子,若与细胞共育将会导致细胞死亡。因此,待测细胞因子作一系列稀释后加至指示细胞培养体系,以检测培养细胞的死细胞数作为判断指标,死细胞数量与细胞因子的活性呈正比。应用一系列稀释的细胞因子标准品,制作其活性与剂量关系的标准曲线,以此作为待测细胞因子活性的定量测定。;(三)抗病毒活性测定法

本法常用于IFN等的测定,IFN可诱导细胞产生抑制病毒RNA和DNA合成的酶,保护细胞不受病毒感染从而抑制细胞病变。;(四)趋化活性测定法

多种细胞因子具有趋化活性,能分别诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞和淋巴细胞等定向迁移。

;利用分子生物学技术,制备出细

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