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基因工程的基本操作程序

自主学习（理知识，固基础）

基因工程的基本操作程序主要包括四个步

骤：、、、。

学点一、目的基因的获取：

1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的。也可以是一些具有的因子。

2．获取目的基因的方法

(1)从基因文库中获取目的基因

①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多，导入受体

菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基

因文库。

②种类

基因组文库：含有一种生物的基因。

部分基因文库：含有一种生物的基因，如cDNA文库。

③目的基因的获取依据：

根据基因的有关信息：基因的序列、基因在上的

位置、基因的产物mRNA、基因的翻译产物蛋白质等特性获取目

的基因。

(2)利用PCR技术扩增目的基因。

①PCR含义：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。

②PCR原理：DNA。

③条件：有一段已知目的基因的序列，以便根据这一序列合成。

④过程：目的基因DNA受热形成，与结合，然后在_________的作用下进行

延伸形成DNA。

n

⑤方式：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成扩增=2(n为扩增循环的次数)。

(3)人工合成法：如果，已知，可以通过用化学方法人工合成。

学点二、

基因表达载体的构建──基因工程的核心

1．表达载体的组成：+++等。

2．启动子：位于基因的，它是和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA，最终获得所

需的。

3．终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的，终止。

4．标记基因：鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而将筛选出来。常用的标记基因

是。

5．表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中，并且给下一代；同时使目的基因能够

___和作用。

6．不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。

学点三、将目的基因导入受体细胞

(一)转化的概念：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内和过程。

(二)常用的转化方法：

1．将目的基因导入植物细胞

(1)农杆菌转化法

①农杆菌特点：易感染植物和裸子植物，对_______

植物没有感染力；Ti质粒的可转移至受体细胞，

并整合到受体细胞的染色体上。

②转化过程：目的基因插人农杆菌→导入

植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

(2)基因枪法

基因枪法：是植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。

(3)花粉管通道法

花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法（我的的转基因抗虫棉就是

用此种方法获得的）。植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物

受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助

进入受体细胞。

2．将目的