小鼠囊胚在孵化期间关键基因表达动态变化 .pdfVIP

第43卷第2期华中农业大学学报Vol.43No.2

2024年月3JournalofHuazhongAgriculturalUniversityMar.2024，197~204

刘子涵，滕亚迪，马梅香，等.小鼠囊胚在孵化期间关键基因表达动态变化［J］.华中农业大学学报，2024，43（2）：197‐204.

DOI：10.13300/ki.hnlkxb.2024.02.022

小鼠囊胚在孵化期间关键基因表达动态变化

刘子涵，滕亚迪，马梅香，吴俞霖，安礼友

新疆大学生命科学与技术学院，乌鲁木齐830017

摘要为探索囊胚孵化发育中关键基因的表达规律、进一步解析妊娠识别机制，以小鼠囊胚为模型，对孵化

进程中不同时期的囊胚进行转录组分析，并对关键基因表达量进行qPCR检测，对关键蛋白表达模式进行免疫

荧光染色。转录组分析发现小鼠囊胚从扩张、孵化到完成孵化的孵化过程，差异基因表达呈2种调控模式，对调

控模式中的基因集进行GO分析、KEGG分析，发现涉及免疫与炎症、细胞分化、凋亡过程等生物过程。qPCR结

、、、、

果显示Ptgs1Lyz2Il⁃1CfbαCcl9表达上调，Cd36表达下调，结果与转录组分析一致。免疫荧光染色分析发现

Plac1、Cdx2、C3在小鼠囊胚孵化过程中表达下调，Lyz2、Il‐1则β表达上调。以上研究结果表明小鼠囊胚在孵化

进程中，基因表达呈特定的分化动态，异常基因表达将导致孵化停滞。

关键词小鼠囊胚；孵化；基因表达；分化模式；生长发育

中图分类号Q7文献标识码A文章编号1000-2421（2024）02-0197-08

哺乳动物胚胎发育从受精开始，经过一系列细孵化后和孵化停滞4个阶段，通过转录组分析各孵化

胞增殖和分化，最终形成一个由滋养外胚层（trophec‐阶段基因表达的差异，得到孵化的差异表达基因；选

toderm，TE）围绕内细胞团（innercellmass，ICM）的取其中10个差异表达目标基因，通过荧光定量PCR

空腔结构，即囊胚。随着囊胚腔的不断扩大，胚胎从（qPCR）检测4个时期的囊胚基因表达，采用免疫荧

透明带中孵化出来与子宫内膜接触，开始胚胎植入光染色对基因蛋白表达进一步验证，旨在为进一步

和妊娠，从而在子宫内发育成完整个体［1-2］。囊胚孵解析囊胚孵化过程中的分子事件提供基础数据，有

化是植入之前一种必需的早期发育现象，过程包括望为辅助生殖技术的开发和优化提供新思路。

胚泡扩张、压力增加、透明带变薄至破裂［3-4］，是胚胎1材料与方法

具备着床活力和成功怀孕的先决条件，决定了胚胎

随后的生存和发育。囊胚孵化是非常重要且被精确1.1实验动物

调控的生理现象［5］。这些调控都具有精确的时空模本研究所用5~7周龄雌鼠和8周龄ICR雄鼠来

式，在这期间会发生大量细胞因子的动态表达，如类源于新疆医科大学实验动物中心。小鼠饲养在规范

固醇激素、生长因子、细胞因子、酶和转录因子等［6］，的鼠房中［温度（23±2）℃，湿度（25±3）%，开关灯

都参与了植入前囊胚的发育调节，为胚胎植入提供时间间隔为12h］。动物实验遵照新疆大学动物实验

了良好的环境。目前已有的研究主要关注囊胚及之与实验动物福利相关规范（XJUAE-2022-07）实施。

后发育的细胞胚层谱系演化和调控分子机制［7-8］，对1.2试剂与仪器

囊胚孵化期间的基因表达动态关注较少。试剂：孕马血清促性腺激素（PMSG）、人绒毛膜

孵化对哺乳动物囊胚的着床至关重要，任何影促性腺激素（