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慢病毒载体介导的CXCR7-shRNA联合重楼总皂苷对胃癌细
胞SGC7901特异性靶向干预的实验研究
赵东文;李谌;王海龙;陆航
【摘要】ObjectiveToinvestigatetheCXCR7proteinexpressionwhen
CXCR7-shRNAtransfectedintohumangastriccancercellwhichmediated
withlentivirusvectorcombinedwithRhizomaParidisTotalSaponin.
MethodsThreeshRNAsequencesofCXCR7andonenegativecontrol
sequenceweredesignedandsynthesized,andrecombinantlentiviral
vectorswithpSilencerTM4.1systemwereestablished.TransfectionofHEK
293Tcellsandpackagingviralwerefinishedandthetitersweredetected.
Transfectionofallrecombinantlentiviralvectorsandnegativecontrol
vectorwerefinishedandexpressionofCXCR7mRNAweredetectedby
RT-PCRmethod.Silenceefficiencyingroupsweredeterminedandthe
expressionvectorwithhighestsilenceefficiencywasselectedfornext
experiments.TodetecttheeffectofSGC7901cellproliferationbyCXCR7-
shRNAtransfectionandcombinedwithRhizomaParidisTotalSaponin
interventionwithMTT.TodetecttheeffectofSGC7901cellexpressionof
proteinbyCXCR7-shRNAtransfectionandcombinedwithRhizomaParidis
TotalSaponininterventionwithWesternblot.ResultsThepackagingof
threelentiviralvectorandnegativecontrolsequencearesuccessfulwhich
isconfirmedbygenesequencingandthetiterare4.9×108pfu/mL,
3.6×108pfu/mL,5.2×108pfu/mL,2.0×108pfu/mLrespective.The
expressionquantityofCXCR7mRNAinpositivegroupsarelowerthan
negativecontrolgroup(P0.05)andinhibitionratiotoCXCR7inCXCR7-
shRNA-1andcombinedwithRhizomaParidisTotalSaponinintervention
groupishigherthantheothertwogroups(P0.05).Theproliferationlevel
oftumourcellissignificantreductionafterCXCR7-shRNA-1transfection
andhaveasignificantdifferencecomparingtothegroupwithout
transfection(P0.05).TheexpressionofCXCR7proteinissignificant
reductionafterCXCR7-shRNA-1transfe
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