遗传学综合实验开题报告《小红葱与四季葱细胞染色体观察及核型分 .pdfVIP

华南师范大学生命科学学院

遗传学综合实验开题报告

课题名称：小红葱与四季葱细胞染色体观察及核型分析

指导老师：黎杰强朱碧岩

小组成员：义忠仁Ricky

一、课题的选择

小红葱与四季葱细胞染色体观察及核型分析

二、研究意义与国内外研究概况

葱属（Allium）隶属于百合科（Liliaceae），是一种食

用价值高、有一定药用价值和观赏价值并具有多种抗逆性

的草本植物。

葱类蔬菜在我国栽培历史悠久，其中大蒜、大葱、韭

菜和洋葱栽培尤为普遍。它们在不同的生态环境下，通过

人工选择和自然淘汰，产生了丰富的形态变异和生态分化

类型。

根据李锡香（2002），到2001年底，我国种质资源库

收集大葱种质材料236份、分葱种质材料36份、洋葱70

份、韭菜8份、南欧韭2份，主要来自国内各省市的地方

品种。另外，欧洲Gatersleben（德国）基因库和国际园艺

研究中心（UK）的蔬菜基因库中也保存107份种质。但

在葱资源的种植、交流过程中出现诸如栽培品种集中于少

数地方主栽品种，而某些具有独特优良种性的地方品种逐

渐被淘汰以及由于广泛引种或繁种技术不规范导致部分

葱品种种性因天然杂交而退化的现象，葱资源所固有的遗

传多样性发生丢失，因此，资源的搜集、评价和保护应当

成为当前葱育种工作的重要内容。

三、研究的主要内容

1.实验材料：小红葱、四季葱

2.实验试剂：70%乙醇、冰醋酸、0.1%秋水仙碱、1mol/L

HCl、改良品红等

3.实验用品：显微镜、测微尺、培养皿、恒温水浴锅、

温度计、烧杯、量筒、染色缸、剪刀、镊子、刀片、

载玻片、盖玻片、酒精灯等

4.实验步骤：

（1）材料培养：用沙培法培养小红葱和四季葱。

（2）预处理：用0.1%秋水仙碱溶液非离体处理带根种子

3h。

（3）固定：将预处理后的材料水洗2~3次，剪取根尖约

0.5cm移入卡诺氏固定液（乙醇3份，冰醋酸1

份）中，4°C~15°C条件下固定20~24h。

（4）解离：用蒸馏水漂洗材料后置于60°C恒温水浴锅

中预热的1mol/LHCl中，解离8~10min然后用蒸

馏水冲洗2~3次。

（5）染色：将材料置于载玻片上，去除根冠和伸长区仅

留分生区部分，加1滴改良品红，染色约10min。

（6）压片：取染色的根尖置于载玻片中央，用吸水纸吸

去多余溶液，加1滴新鲜染料，盖上盖玻片，并

在盖玻片上盖上一些吸水纸，用解剖针轻敲盖玻

片，使材料分散。

（7）镜检：先在低倍镜下观察，找到好视野后转换高倍

镜。

（8）核型分析：

①显微摄影：选择10个中期分裂象较好的细胞，进行

显微摄影，打印出来，并统计各细胞染色体数目，

记录结果。

②标本测量与放大：显微镜下用测微尺测量每条染色

体的绝对长度，进行显微摄影将标本转换成放大照

片（记录放大倍数）。

③照片测量：测量照片上各染色体的长臂（P）、短臂

（Q）的臂长。

④计算：计算有关指标的数值（绝对长度、相对长度、

臂比值、着丝点指数）

⑤剪分与配对：将照片剪分成各单个染色体，按表型

特征将全部染色体配同源对。

⑥排列：将染色体全部同源对按一定规则依次整齐排

列，并编上序号。

⑦翻拍定型：将上述排序队列翻拍定型，制作终定的

核型照片。

四、预期结果

统计小红葱、四季葱细胞内染色体数目，观察染色体形态

并测量出每条染色体的绝对长度、各臂长度，计算出有关

指标的数值（绝对、相对长度，臂比值，着丝点指数），

按一定规则排列各染色体并制作终定的核型照片。

五、进度安排

2015年10月15~26日：小红葱及四季葱的培养

2015年10月27日~11月3日：小红葱及四季葱的细胞染

色体观察及核型分析

2015年11月3~8日：实验结果整理及报告撰写

六、为