有哪些信誉好的足球投注网站- 1、本文档共8页，可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
1
葡萄糖氧化酶耐热性测定水浴法
1范围
本文件规定了以水浴法测定葡萄糖氧化酶的耐热性，适用于测定酶蛋白的耐热性。本文件适用于耐热型葡萄糖氧化酶产品，适用于固态及液态产品。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1葡萄糖氧化酶活性单位Glucoseoxidaseactivityunit
在温度37℃,pH6.0的条件下，1min催化β-D-葡萄糖氧化产生出1μmoL过氧化氢所需的酶量，即为1个酶活力单位，以U表示。
3.2
酶活性存留率enzymeactivityretentionrate
未经热处理酶活性为初始酶活性，经高温处理后为处理后酶活性，处理后酶活性与初始酶活性的比值为酶活性存留率。
4原理
将葡萄糖氧化酶试样稀释至一定浓度，通过试管在恒温水浴锅中高温处理，检测试样在高温条件下的酶活性变化，测定葡萄糖氧化酶的耐温酶活性存留率。
5试剂或材料
除非另有说明，仅使用分析纯试剂。
5.1水：GB/T6682，三级。
5.20.1mol/L磷酸二氢钠溶液：称取15.605gNaH2PO4·2H2O，加水溶解并定容至1L。
5.30.1mol/L磷酸氢二钠溶液：称取35.82gNa2HPO4·12H2O，加水溶解并定容至1L。
5.40.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.0）：分别取0.1mol/L磷酸二氢钠溶液877mL，0.1mol/L磷酸氢二钠溶液123mL混和成磷酸盐缓冲液，再用0.1mol/L的磷酸氢二钠溶液或0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液调节pH至6.0。
6仪器设备
6.1分析天平：精度0.0001g。
6.2pH计：精确至0.01。
2
6.3恒温振荡器：精确至±1.0℃。
6.4恒温水浴锅：精确至±0.1℃,带循环水泵。
6.5秒表：每小时误差不超过5s。
6.6离心机：转速4000r/min以上。
7试验步骤
7.1样品制备
7.1.1固态样品
平行做2份试验。称取0.2~1g试样，精确至0.0001g，置于锥形瓶中，加入100mL磷酸盐缓冲液（5.4），置于25℃恒温振荡器中提取30min，室温静止10min，离心或过滤，取上清液或滤液，使用磷酸盐缓冲液（5.4）进行稀释，将葡萄糖氧化酶活性控制为2~20U/mL，作为待处理酶稀释液。
7.1.2液态样品
平行做2份试验。移取0.2~1mL试样，使用磷酸盐缓冲液（5.4）进行稀释，将葡萄糖氧化酶活性控制为2~20U/mL，作为待处理酶稀释液。
7.2初始酶活性的检测
参考附录A，检测以上待处理酶稀释液的初始酶活，记为U。
7.3水浴法处理
取5mL待处理酶稀释液于10mL带盖玻璃试管(φ15×100mm，保持试管一致性）中，置于（75℃、80℃、85℃、90℃)水浴锅（水浴锅开孔位φ60mm，水浴锅水位加至边沿下2cm处）中，精确计时5min，立即取出放入冰水浴中，冷却至室温。
参考附录A，检测热处理后酶活性，记为U1。
8试验数据处理
8.1结果计算
酶活性存留率按式（1）计算：
K=×100%………………(1)
式中：
K—酶活性存留率，%；
U—初始酶活性；
U1—高温处理后酶活性。
8.2结果表示
平行试样的测定结果用算术平均值表示，计算结果小数点后保留两位有效数字。
9精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%。
3
附录A
（资料性）
葡萄糖氧化酶活性测定方法
A.1原理
在葡萄糖氧化酶的作用下，葡萄糖和氧反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢和无色的还原型邻联茴香胺在过氧化物酶的作用下，生成水和棕色的氧化型邻联茴香胺，棕色的氧化型邻联茴香胺与硫酸溶液反应变为粉红色，可于波长540nm处比色测定。
A.2试剂和材料
除非另有说明，仅使用分析纯试剂。
A.2.1水：GB/T6682，三级。
A.2.20.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.0）
甲液0.1mol/LNaH2PO4·2H2O：称取15.605gNaH2PO4·2H2O，加水溶解并定容至1L。乙液0.1mol/LNa2HPO4·12H2O：称取35.82gNa2HP
文档评论（0）