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贲门癌组织中CD133蛋白的表达及与幽门螺杆菌感染的关系

目的：研究贲门癌组织中CD133蛋白表达及其与幽门螺杆菌（H.pylori，

HP）感染的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测62例贲门癌手术切标本

及41例癌旁正常组织中CD133蛋白的表达，采用改良Giemsa染色法检测103

例标本中HP感染情况，分析CD133蛋白表达在贲门癌发生中的作用及其与HP

感染的关系。结果：62例贲门癌组织中有30（48.4%）例出现CD133蛋白阳性

表达，而41例癌旁正常组织中仅有11例（26.8%）出现CD133蛋白阳性表达

（P=0.023）。在有HP感染标本中CD133表达率为65.8%（50/76），而在没有

HP感染标本中CD133表达率为25.9%（7/27）。经Spearman相关检验，CD133

表达与幽门螺杆菌感染呈正相关（r=0.655，P＜0.001）。结论：CD133蛋白参与

了贲门癌的发生发展，且与幽门螺杆菌感染密切相关。

标签：CD133蛋白；幽门螺杆菌感染；贲门癌

1引言

由幽门螺杆菌感染（H.pylori，HP）引起的慢性炎症被公认为贲门癌发生的

重要原因。这些慢性炎症会导致胃粘膜反复的损伤与修复，从而导致贲门粘膜过

度增生，有丝分裂错误的概率增加，进而导致贲门癌的发生。近期研究发现，这

些能够导致贲门癌发生的炎症环境与周围组织骨髓衍生细胞（bone

marrow-derivedcells，BMDCs）的引导和植入相关[1-2]。而BMDCs表面抗原标

志物CD133更是是目前各种肿瘤研究的热点标志物之一。CD133蛋白已在近期

的研究中被证实与大肠癌，脑胶质瘤和肝癌的发生有关[3-5]。但调控其表达原因

尚不明确。本研究应用免疫组化技术测定贲门癌及癌旁正常组织中CD133的表

达情况，采用改良Giemsa染色法检测103例标本中幽门螺杆菌感染情况，探讨

CD133表达与贲门癌发生的关系及其与幽门螺杆菌（H.pylori，HP）感染的关系.

2材料和方法

2.1材料

随机选取我院肿瘤外科近一年来贲门癌术后男51例女11例共62例标本，

同时选取41例癌旁组织（标准为距癌缘大于5cm并经组织学证实为正常组织）。

所有组织用10%甲醛溶液固定，连续切片3张（厚度4μm），第一张行HE染色；

第二张免疫组化染色，第三张备用。患者均为首次发现贲门癌，术前未经过放化

疗。据2003年国际抗癌联盟标准病理TNM分期，Ⅰ期21例，Ⅱ期19例，Ⅲ

期15例，Ⅳ期7例。

2.2方法

2.2.1试剂：一抗，鼠抗人CD133单克隆抗体，购自德国MiltenyiBiotec公

司PV9000免疫组化试剂盒购北京中杉金桥公司，Giemsa染料购自上海三爱思公

司。

2.2.2免疫组化：严格按照PV9000试剂盒操作步骤进行。常规脱蜡、梯度乙

醇水化，抗原采用微波热修复，滴加一抗后4°保存12小时。3%H2O2灭活内

源性过氧化物酶，PBS冲洗显色，苏木精复染，树脂封片

2.2.3HP检测：采用改良Giemsa染色法，常规脱蜡，梯度乙醇水化，2%Giemsa

染液染色25min，洗去染液，使用乙醇梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

2.3结果判定

判定采用双盲法进行，两位病理专家同时、独立阅片，有差异者进行共同阅

片后判定。免疫组织化学染色结果显示：阳性细胞位于腺腔，定位于胞膜，染色

呈金黄色。根据阳性细胞所占病变细胞的百分比分为3个等级：1%～25%为（+），

26%～50%为（++），50%为（+++）。

2.4统计学方法

采用SPSS17.0统计软件包统计分析本次实验数据。贲门癌和癌旁正常组织

中CD133的表达差异分析采用χ2检验或者Fisher确切概率法，CD133的表达与

HP感染的相关性分析采用Spearman相关性分析

3结果

3.1CD133蛋白在贲门癌与癌旁正常组织中的表达情况。

CD133蛋白阳性表达定位于腺腔细