紫外分光光度法的应用.ppt

(3)图计算法----两组分吸收光谱完全重叠--混合样品测定(3)图中，a,b吸收光谱双向重迭，互相干扰，在最大波长处互相吸收。处理方法如下：1.解线性方程组法过程：第32页,共39页，5月，星期六，2024年，5月2.等吸收双波长法-注：须满足两个基本条件选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大第33页,共39页，5月，星期六，2024年，5月使用注意点1.开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。2.测定紫外波长时，需选用石英比色皿。3.使用的比色皿必须洁净，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留，切勿用手捏透光面，并注意配对使用，比色皿放入样品室时应注意方向相同。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。4.比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。使用挥发性溶液时应加盖。5.供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。第34页,共39页，5月，星期六，2024年，5月6.测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。7.测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。8.如果仪器不能初始化，关机重启；如不成功，请向管理老师反映。9.如果吸收值异常，依次检查：波长设置是否正确（重新调整波长，并重新调零）、测量时是否调零（如被误操作，重新调零）、比色皿是否用错（测定紫外波段时，要用石英比色皿）、样品准备是否有误（如有误，重新准备样品）。使用注意点第35页,共39页，5月，星期六，2024年，5月10.供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。?11.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。使用注意点第36页,共39页，5月，星期六，2024年，5月分光光度计原理第37页,共39页，5月，星期六，2024年，5月721单束分光光度计第38页,共39页，5月，星期六，2024年，5月感谢大家观看第39页,共39页，5月，星期六，2024年，5月**关于紫外分光光度法的应用一、物质对光的选择性吸收●物质的颜色由物质与光的相互作用方式决定。●人眼能感觉到的光称可见光，波长范围是：400~760nm。●让白光通过棱镜，能色散出红、橙、黄、绿、蓝、紫等各色光。●单色光：单一波长的光●复合光：由不同波长的光组合而成的光，如白光。●光的互补：若两种不同颜色的单色光按一定比例混合得到白光，

称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。第2页,共39页，5月，星期六，2024年，5月物质的颜色：是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生。

即物质的颜色是它所吸收光的互补色。无色溶液：透过所有颜色的光有色溶液：透过光的颜色黑色：吸收所有颜色的光白色：反射所有颜色的光物质的本色第3页,共39页，5月，星期六，2024年，5月完全吸收完全透过吸收黄光光谱示意表观现象示意复合光蓝光无色黑色物质的颜色与光的关系第4页,共39页，5月，星期六，2024年，5月基于物质吸收紫外或可见光引起分子中价电子跃迁、产生分子吸收光谱与物质组分之间的关系建立起来的分析方法，称为紫外可见分光光度法（UV-vis）。二、紫外-可见分光光度法（1）灵敏度高，可测到10-7g/ml。（2）准确度好，相对误差为1%-5%，满足微量组分测定要求。（3）选择性好，多种组分共存，无需分离直接测定某物质。（4）操作简便、快速、选择性好、仪器设备简单、便宜。（5）应用广泛，无机、有机物均可测定。第5页,共39页，5月，星期六，2024年，5月紫外-可见分光光度法的基本原理一、透光率（透光度）和吸收度①透光率T定义：T取值为0.0%~100.0%T=0.0%：光全吸收T=100.0%：光全透过②吸光度（吸收度）AT=ItI0×100%显然，T↑，溶