疑难血型鉴定与疑难配血.ppt

*1．酶（除唾液酸分子，降低红细胞表面电荷）2．聚凝胺试剂3．聚乙二醇（浓缩抗体）4．白蛋白添加剂（牛血清：在低离子浓度下可提高抗体浓度）5．低离子液（大部分LISS含盐离子和大分子化合物）*2.红细胞额外反应----获得性B抗原（类B）临床提示：细菌感染（尤其是肠道细菌感染），以前为O型或A型。实验结果：解决方法----用酸化（pH6.0）抗-B检测（无凝集）----吸收放散实验，吸收抗-B的能力弱，区别于亚型*临床追踪，感染控制后“类B”现象消失第31页,共62页，星期六，2024年，5月第32页,共62页，星期六，2024年，5月混合凝集（mf）混合凝集（mf）：部分红细胞凝集（大凝集块）部分红细胞均匀分布（背景浑浊）----近期输异型血----造血干细胞移植第33页,共62页，星期六，2024年，5月ABO血型不同的造血干细胞移植后，如果植入存活，受者逐渐转变为供者血型的过程中，可能呈嵌合体状态。如果供者O型，受者非O型，受者的A或B抗原逐渐减弱，抗体逐渐被检出。是移植物存活的指标之一。第34页,共62页，星期六，2024年，5月三个月内输异型血，一般直接抗人球蛋白试验（DAT）阳性血型鉴定：毛细管离心法（分离年轻和衰老红细胞）DNA鉴定（供者白细胞在受者外周血中存活期短，一般不干扰受者DNA鉴定）第35页,共62页，星期六，2024年，5月RhD误定----D抗原阳性误定阴性，D抗原阴性误定阳性----特例弱D----D抗原遮断第36页,共62页，星期六，2024年，5月解决疑难血型攻略采用最经典的试管方法用洗涤充分的红细胞制备悬液增加高效价人源抗血清检测增加抗-AB、抗-H和抗A1检测吸收放散实验DNA检测直抗试验*。第37页,共62页，星期六，2024年，5月血型检定，抗体筛查和交叉配血三步也是确保安全有效输血的三关，交叉配血是最后一关，也是“三关”中最重要的一关。只要交叉配血真正相合（相容），将血液输给患者才是安全的。第38页,共62页，星期六，2024年，5月主侧配血----患者血清与供者红细胞配血次侧配血----供者血清与患者红细胞配血----全血要求交叉配血----血浆则只要求ABO同型输注。----不含血浆的红细胞只要求主侧配血第39页,共62页，星期六，2024年，5月一般情况下，只要ABO、RhD血型检定正确供/受者ABO、RhD同型配血，多数情况是相合的如果不相合，则视为“疑难配血”一般只有配血相合，才能输血配血不相合，不能输血特殊情况例外第40页,共62页，星期六，2024年，5月交叉配血的方法聚凝胺配血？抗球蛋白试剂配血？卡式配血？第41页,共62页，星期六，2024年，5月AABB推荐方法TheAntiglobulinTestOtherMethodstoDetectAntigen-AntibodyReactionsSolid-PhaseRedCellAdherenceTestsColumnAgglutinationTechnologyEnzyme-LinkedImmunosorbentAssay第42页,共62页，星期六，2024年，5月《全国临床检验操作规程》第二篇临床血液学检验第六章血型血清学检查p246-271第七节交叉配血试验p262一、交叉配血方法p262-264（一）盐水介质配血法（二）酶技术配血法（三）抗人球蛋白配血法(四)LISS配血法(五)微柱凝胶卡配血法详见本章第四节第六部分。第四节血清学常用检查六、凝聚胶试验P258第八节微柱凝胶试验可用于交叉配血p265第43页,共62页，星期六，2024年，5月抗球蛋白试验(也成Coombs试验），它是以抗人球蛋白试剂作为连接桥，使不完全抗体致敏的红细胞连接并发生凝集。第44页,共62页，星期六，2024年，5月微柱凝胶实验（简称MCGT）1986年法国的YvesLapierre首先发明此方法,1994年获美国FDA批准使用----凝胶过滤技术和免疫学的产物----是抗人球蛋白试验的技术延伸原理：一定浓度的凝胶如筛子，把产生凝集的细胞团块阻挡于凝胶顶部，没有产生凝集的单个细胞则能够通过离心沉降于微管底部。第45页,共62页，星期六，2024年，5月微柱凝胶实验4+ 3+ 2+ 1+ +/- - 溶血双群第46页,共6