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pUC182.7kbHindIIISphIPstISalIBamHISmaIKpnIEcoRIAprlacZ’oriBBEP4.0kb1.0kb0.8kb区分重组子与非重组子用BamHI酶切转化子质粒DNA电泳观察酶解产物片段重组子:2.7kb+4.0kb非重组子:2.7kb如果外源DNA片段也是2.7kb,最好选用单一切口的酶将质粒线型化,然后通过其长度来鉴定其是否为重组子
pUC182.7kbHindIIISphIPstISalIBamHISmaIKpnIEcoRIAprlacZ’oriSSBP4.0kb1.0kb0.8kb区分重组子与非重组子如果外源DNA片段插在pUC18的SphI位点处,原则上也可用SphI酶解鉴定,但这样做很不经济,因为SphI非常昂贵(每100单位50美元)。用HindIII和EcoRI联合酶解同样可以达到目的,但这两种酶的价格只及SphI的1/50
pUC182.7kbHindIIISphIPstISalIBamHISmaIKpnIEcoRIAprlacZ’oriBBEP4.0kb1.0kb0.8kb区分目的重组子与非目的重组子用EcoRI酶切转化子质粒DNA目的重组子:3.0kb+3.7kb或者:1.0kb+5.7kb用PstI酶切转化子质粒DNA目的重组子:3.2kb+3.5kb或者:0.8kb+5.9kb
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