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中国药理学通报ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ２０２４Ｊａｎ；４０（１）：１８９～９４·１８９·
网络出版时间：２０２４－０１－１０１０：３５：５２网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ１８３２．０５２
实验方法学
肝星状细胞特异性Ｇｒｋ２基因敲除小鼠模型的制备及鉴定
１１１１１１２１１
王语涵，许雅萍，李南，陈婷婷，李玲，高萍萍，王华，魏伟，孙妩弋
（１．安徽医科大学临床药理研究所，抗炎免疫药物教育部重点实验室，安徽合肥２３００３２；
２．安徽医科大学第一附属医院肿瘤科，安徽合肥２３００２２）
ｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２３１０００９Ｇ蛋白偶联受体激酶２（Ｇｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｋｉｎａｓｅ
文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２４）０１－０１８９－０６２，ＧＲＫ２）是一种丝氨酸／苏氨酸激酶，广泛表达于多种组织
中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２４７；Ｒ３４５５７；Ｒ３９４２；Ｒ９７７３中［１］。ＧＲＫ２蛋白由６８９个氨基酸残基组成，其结构包括氨
摘要：目的利用ＣｒｅｌｏｘＰ基因敲除技术建立肝星状细胞特基端结构域、激酶结构域和羧基端结构域。ＧＲＫ２不仅能磷
异性Ｇ蛋白偶联受体激酶２（Ｇｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｋｉ酸化Ｇ蛋白偶联受体，参与其信号调节，还可以磷酸化多种
ｎａｓｅ２，ＧＲＫ２）基因敲除小鼠模型，为研究ＧＲＫ２在肝星状细非受体底物，并以激酶活性依赖的方式与其他底物相互作
胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将ｌｏｘＰ标记用［２］。ＧＲＫ２也可与细胞内激酶信号分子直接作用并调节
［３］
ｆｌ／ｆｌ其活性，如ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ、ＭＥＫ１／２、ｐ３８ＭＡＰＫ。此外，ＧＲＫ２
的Ｇｒｋ２基因小鼠（Ｇｒｋ２）和ＬｒａｔＣｒｅ工具鼠进行多次繁
ＨＳＣ还可结合并磷酸化细胞骨架蛋白，包括ｔｕｂｕｌｉｎ、ｅｚｒｉｎ、ｓｙｎｕ
Δ
殖，建立肝星状细胞特异性Ｇｒｋ２基因敲除（Ｇｒｋ２）小鼠模
［４］
型。观察和分析小鼠的生长繁殖情况；通过ＰＣＲ反应鉴定ｃｌｅｉｎ。提示ＧＲＫ２参与多种细胞内信号转导，进而影响疾
ｆｌｏｘ和Ｃｒｅ基因型；免疫荧光双染检测肝星状细胞中ＧＲＫ２病的发生发展。
表达；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测小鼠肝星状细胞及肺、脾、肾脏、心脏１９９６年，Ｊａｂｅｒ等［５］提出，Ｇｒｋ２基因敲除纯合子
－／－－／－
组织中ＧＲＫ２蛋白表达；ＨＥ染色观察肝脏及肺、脾、心脏、肾（Ｇｒｋ２）小鼠具有胚胎致死性。Ｇｒｋ２胚胎在妊娠１５５
＋／－
ＨＳＣ
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