牛病毒性腹泻病毒E2抗体的制备 .pdfVIP

中国动物传染病学报2023,31(4):189-194ChineseJournalofAnimalInfectiousDiseases

·简报·

牛病毒性腹泻病毒E2抗体的制备

李胜文，王炜，赵文栋，丁乃峥，王洪梅，何洪彬，何成强

（山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性重点实验室，济南250014）

摘要：为获得牛病毒性腹泻病毒（BVDV）E2蛋白的多克隆抗体，本研究截短了BVDVE2氨基端前600个碱基，并构建原核表

达载体pET28a-E2，优化E2序列并将重组载体转化到BL21感受态细胞中。37℃、1mmol/LIPTG条件下诱导4h，SDS凝胶

电泳观察在15kDa处表达目的蛋白。Ni-NTA亲和层析纯化E2蛋白并免疫小鼠制备鼠抗血清。以获得的血清为一抗，Westernblot

检测pET28a-E2在BL21中表达的总蛋白，证明免疫性良好。利用BVDV感染MDBK细胞，Westernblot成功检测到MDBK细胞表

达的E2蛋白，证明E2抗体具有良好的特异性。ELISA检测E2多克隆抗体的效价达1∶128000。本研究成功制备出BVDVE2多克

隆抗体，为进一步研究该蛋白的功能及BVDV活载体疫苗的鉴定提供了技术和材料支持。

关键词：牛病毒性腹泻病毒；E2基因；原核表达；多克隆抗体

中图分类号：S852.65文献标志码：B文章编号：1674-6422（2023）04-0189-06

PreparationofE2AntibodiesAgainstBovineViralDiarrheaVirus

LIShengwen,WANGWei,ZHAOWendong,DINGNaizheng,WANGHongmei,

HEHongbin,HEChengqiang

(ShandongKeyLaboratoryofAnimalResistance,CollegeofLifeSciences,ShandongNormalUniversity,Jinan250014,China)

Abstract:InordertoobtainthepolyclonalantibodyagainstbovineviraldiarrheavirusE2protein,inthisstudy,therst600bpofthefi

optimized,andtherecombinantvectorwastransformedintoBL21capablecells.Thetargetproteinwasinducedat37and1mmol/L

℃

preparedhadgoodspecifi

theidenticationofBVDVlivevectorvaccine.fi

E2

Keywords:Bovineviraldiarrheavirus;gene;prokaryoticexpression;polyclonalantibodies

[2]

牛病毒性腹泻（bovineviraldiarrhea,BVD）是（PI）为临床症状的重大疾病，对养殖业造成了

由牛病毒性腹泻病毒[1]严重的经济损失[1-2]

（Bovineviraldi