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《生命科学研究进展》复习—题目和答案
王义权老师(6题)
1、什么是DNA分子标记?
DNA是生物遗传信息的载体,任何生物的遗传信息都具有种属特
异性。生物体一切具有其种属特异性的特征,均可作为标记。DNA分
子标记是DNA分子中能够反映生物种属特异性的序列特征,这种特征
可以用多种方法揭示。
2、DNA分子标记的种类有哪些?
DNA分子标记有:限制性长度多态性RFLP、PCR-RFLP、CAPS、
DNA指纹、随机扩增多态性RAPD、序列特征扩增区SCAR、位点特
异性PCR(AS-PCR)、单链构象多态性SSCP、扩增片段长度多态性
AFLP、序列分析、单核苷酸多态性SNP、表达序列标签EST、序列标
签位点STS、简单序列重复SSR、简单序列长度多态性SSLP、微卫星
序列DNA、VNTR等。
3、DNA分子标记有哪些用途?
在基因组研究中的作图;
动植物遗传育种中的应用;
医学遗传学和疾病的诊断;
传染病的病原生物检测:如SARS,禽流感病毒;
生物样品的检验如海关检疫、法医鉴定、中药材鉴定等;
在动物学研究中的应用。
4、简要说明RFLP的原理并举例说明其应用。
RFLP的原理是限制性内切酶(II型酶)对特定序列的识别,并在
识别位点专一性地将双链DNA切开。多数限制性内切酶识别的是
DNA分子中4~6bp的特征序列,而基因组DNA分子中散布着多种
内切酶的识别序列,故可将不同生物的DNA分子切成长短不一的
DAN片段。每4nbp处有一切点,理论上切点的频率为基因组总长/
4nbp,因此对某一特定基因组,识别位点碱基数多的限制酶,在该基
因组中的识别位点数就少;反之就多。切点的多少可由酶切后的DNA
片段长度检验。可以应用于物种遗传多样性分析。
5、举例说明DNA分子标记在动物学研究中的应用。
DNA分子标记在动物学研究中的应用包括估算遗传距离、重建系
统发生树、分析种群结构及分子生态学、测定种群遗传多样性及应用
于保护生物学、系统地理学、鉴定物种或种群等。
例:厦门海域文昌鱼的研究:通过设计Cytb和12SrRNA基因扩
增引物,PCR扩增,测序和序列比对、MEGA数据分析,得出结论厦
门有2种文昌鱼,二者的遗传距离达到21.13%;其中有一种(来自黄
厝)与来自日本海域的文昌鱼的遗传距离只有0.56%;详细的观察、测
量与比较,进一步确定其作为2个不同的物种在厦门海域的存在。
6、名词解释
随机扩增多态性RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA):
根据在庞大的基因组DNA中存在的许多短的颠倒重复序列。用单一引
物,在较低的复性温度下,可以将基因组中两个相邻的颠倒重复序列
间的DNA片段扩增出。通过琼脂糖凝胶电泳等分离手段,可将扩增产
物按片段大小分离,形成特定的电泳谱带。
单链构象多态性SSCP(SingleStrandConformational
Polymorphism):DNA单链在变性凝胶电泳中的迁移速率不仅与
DNA片断长度有关,还与特定序列形成的特定空间构象有关。
扩增片段长度多态性AFLP(AmplifiedFragmentLength
Polymorphism):用限制酶切基因组DNA后,装上适当接头,再用选
择性引物扩增,可得到长度多态性很好的DNA片段。
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