《细胞实验》教学课件合集（非AI生成）.pptx

几种常用的光学显微镜;

普通光学显微镜是最通用的一种光学显微镜。利用光线照明，标本中各点依照其光吸收的不同而在明亮的背景中成像。它由物镜、目镜、聚光镜、光源、载物台和支架等部件组成。其中聚光镜用于调节显微镜的照明，物镜和目镜是放大微小物体成像的主要部件。其基本成像原理是：物镜、目镜、聚光镜各自相当于一个凸透镜，被检标本置于聚光器与物镜之间，物镜可使标本在物镜上方形成一个倒立的放大实像。目镜将此倒像进一步放大成像，该虚像看起来好像在离眼睛250mm处（明视距离）。

;1.机械部分：镜座、镜柱、镜臂、镜筒、转换器、载物台

2.照明部分：反光镜或者光源灯、聚光器、光圈

3.光学部分：目镜、物镜

;;普通光学显微镜的几个参数

1.放大率

2.数值孔径

3.分辨力

4.焦点深度

5.视场宽度

6.工作距离

;使用光学显微镜的注意事项

1.取显微镜时，请尽量小心，防止震动损坏镜头

2.观察带有液体的临时标本时，请务必加盖玻片，以免镜头受污染

3.镜头污染时，请用专业擦镜纸及时擦拭，注意单方向擦拭

4.非观察时候，请将物镜镜头偏离光轴，避免镜头受损

5.非教师授课需要及实验室管理员允许，请勿擅自拆卸零件

6.每位同学本学期固定使用一台显微镜，并做好登记工作；如有问题请及时报告管理员老师

;显微标本制作;相差显微镜;荧光显微镜

构造原理：

(1)光源：高压汞灯

(2)滤色镜系统

A激发滤色镜

B阻断滤色镜

(3)分色镜系统

二向色镜

;落射式照明原理;暗视野显微镜;实验原理;材料和试剂;实验内容与方法;实验内容与方法;细胞化学;实验目的;Feulgen反应;Feulgen反应;Brachet反应;PAS反应;细胞化学;Feulgen反应;Brachet反应;PAS反应;细胞膜的渗透性;细胞膜的渗透性;细胞膜的渗透性;细胞膜的渗透性;鸡红细胞的渗透性观察

取试管一支，加入0.14mol/l氯化钠溶液10ml，再加入1ml稀释的鸡血，轻轻摇动，注意颜色有无变化？有无溶血现象发生？若发生溶血，记录时间。编号1。

用0.14mol/l氯化铵，重复上一步骤，纪录结果。编号2。

用0.14mol/l醋酸胺，重复上一步骤，纪录结果。编号3。

用0.27mol/l甘油，重复上一步骤，纪录结果。编??4。

用0.1mol/l草酸铵，重复上一步骤，纪录结果。编号5。

用0.14mol/l硝酸钠，重复上一步骤，纪录结果。编号6。

用0.27mol/l葡萄糖，重复上一步骤，纪录结果。编号7。

用0.1mol/l硫酸钠，重复上一步骤，纪录结果。编号8。

用0.27mol/l乙醇，重复上一步骤，纪录结果。编号9。

用0.27mol/l丙酮，重复上一步骤，纪录结果。编号10。

溶血现象的观察

取试管一支，加入10ml蒸馏水，再加入1ml稀释的鸡血，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成100%红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液。编号11。

;细胞膜的渗透性;细胞膜的渗透性;红细胞凝集反应;细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被(cellcoat)，与细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生等相关。

凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，常用的为植物凝集素，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A（ConA）、麦胚素（WGA）、花生凝集素（PNA）和大豆凝集素（SBA）等。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。;细胞凝集和细胞计数;细胞凝集和细胞计数;细胞凝集和细胞计数;细胞增殖抑制实验;;细胞：HeLa

试剂：二甲亚砜（DMSO）

二甲基亚砜(DMSO)是目前最好的渗透型细胞冻存保护剂，但也是一种对细胞毒性很大的化学试验剂。在深低温(零下200度)保存细胞时冻存过程中，DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤。低温时二甲基亚砜的细胞毒性受到抑制。

技术：细胞计数法;细胞计数;;细胞计数步骤：

1.将血球计数板及盖玻片用蘸95％乙醇的棉团擦干净晾干后，将盖玻片盖于计数池上面。

2.将细胞培养液适当稀释并充分混匀，吸取少量（约10μL）沿盖玻片的边缘充填入计数池中，注意勿发生气泡或使稀释液流出计数池。

3.静置一两分钟后进行计数，计数时为了避免大的误差，应当稀释适当的细胞浓度；为了防止重复和遗漏，应按一定的顺序计数；如果细胞压在格线上时，依照“数上不数下，数左不数右“的原则进行计数；可以多次计数以求平均值。计