3.1重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

从社会中来;指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。;从社会中来;3.1重组DNA技术的基本工具;2．基因工程的诞生和发展;(2)基因工程的发展;3.1重组DNA技术的基本工具;一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”简称：;5.限制酶的识别序列的特点;;平末端平末端;1、各小组之间合作尝试找出手上DNA片段中EcoRⅠ识别的序列，以及切割位点，用剪刀进行切割。

2、在这里剪刀代表什么“分子工具”？如何确定是同一种酶切割的？;学案P42典例剖析

某DNA分子中含有某限制酶的1个识别序列,用该限制酶切割该DNA分子,可能形成的2个DNA片段是()

A.①②B.③④

C.①③D.②④

;学案P42学以致用下图是3种限制性内切核酸酶对DNA分子的识别序列和切割位点图(箭头表示切割位点,切出的断面为黏性末端)。下列叙述错误的是();拓展应用（书本P74）;3-TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG-5;两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来;18;1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是()

A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氨键

B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键

C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键

D.只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，不能连接双链DNA片段的平末端;;;;根据所学知识，完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶;1、载体的作用？

2、载体的种类有哪些？

3、质粒的本质是什么？质粒做载体必须满足哪些条件？;（1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存

（2）有一个至多个限制酶切点

（3）有某些标记基因

（4）对受体细胞无害、易分离;2.在重组DNA技术中，将外源基因送入受体细胞的载体可以是()

A.大肠杆菌的质粒

B.切割DNA分子的酶

C.DNA片段的黏性末端

D.用来识别特定基因的DNA探针;学案P43：学以致用;思考·讨论;思考·讨论;…ATAGCATGCTATCCATG;AATTCGGCATAC…;思考·讨论;有2个不同来源的DNA片段A和B，A片段用限制酶切speⅠ进行切割，B片段分别用限制酶HindⅢ,XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。（1）哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶Spel切割A片段产生的DNA片段相连接？为什么？;（2）不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端，这在基因工程操作中有什么意义？;6.下图为DNA分子的切割和连接流程图。请回答下列问题。;课时训练P15：8;;DNA的粗提取与鉴定;DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等。;1．称取约30g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨。;3.DNA的析出;4.DNA的鉴定;1．以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。

2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

3．利用动物细胞提取DNA破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接吸水涨破。

4．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。

5．提纯DNA时，选用体积分数为95%的冷酒精的原因：体积分数为95%的冷酒精提纯效果更佳。

;6．提纯DNA时，选用体积分数为95%的冷酒精的原因：体积分数为95%的冷酒精提纯效果更佳。预冷的酒精具有以下优点：①可抑制核酸水解酶的活性，进而抑制DNA降解；②抑制分子运动，使DNA易形成沉淀析出；③低温有利于增加DNA分子的柔韧性，减少其断裂。

7.实验中出现的丝状物的主要成分是DNA，实际上每一根“丝”都是由许多DNA分子聚集在一起形成的，应用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌，避免破坏DNA。

8.为减少DNA的损失，过滤过程一般使用纱布过滤。

9.粗提取的DNA中可能含有少量的蛋白质等。

;(1)DNA不溶于酒精，但一些蛋白质溶于酒精，可利用这一原理初步分离DNA与蛋白质。()

(2)研磨之后，通过过滤或离心，DNA会保留在沉淀物中。()

解析：研磨之后，通过过滤或离心，DNA会保留在上清液中。

(3)DNA能与二苯胺试剂在常温下反应