β-catenin信号通路与胰腺癌吉西他滨耐药关系的初步研究的开题报告.pdfVIP

Wnt/β-catenin信号通路与胰腺癌吉西他滨耐药关

系的初步研究的开题报告

一、研究背景与意义

胰腺癌是一种极其恶性的肿瘤，患者预后极差。目前，吉西他滨是

胰腺癌的常用化疗药物，但患者普遍存在药物耐药的问题，因此探究吉

西他滨耐药机制和寻找有效的解决方案非常必要。Wnt/β-catenin信号通

路参与了多种生理和病理过程，包括细胞增殖、分化、凋亡、细胞极性

等。近年来，越来越多的研究表明Wnt/β-catenin信号通路在胰腺癌的发

生、发展和治疗中起着关键的作用。因此，本研究旨在探究Wnt/β-

catenin信号通路与胰腺癌吉西他滨耐药的关系。

二、研究内容与主要难点

本研究将通过以下几个方面来探究Wnt/β-catenin信号通路与胰腺

癌吉西他滨耐药的关系：

（1）建立胰腺癌细胞吉西他滨耐药模型：使用MTS法或MTT法检

测不同剂量吉西他滨对胰腺癌细胞增殖的影响，筛选出具有药物耐药性

的胰腺癌细胞株。

（2）检测Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达：使用实时定量

PCR和Westernblot检测Wnt/β-catenin信号通路中Axin、β-catenin、

TCF/LEF等重要基因的表达水平，并结合免疫组化及免疫荧光染色进一步

验证结果。

（3）观察Wnt/β-catenin信号通路激活后对吉西他滨的影响：使用

siRNA、抑制剂等方法抑制或激活Wnt/β-catenin信号通路，检测吉西他

滨敏感和耐药胰腺癌细胞株的增殖、凋亡和迁移能力变化，探究Wnt/β-

catenin信号通路对吉西他滨的耐药机制及调控机制。

本研究主要难点在于对Wnt/β-catenin信号通路在胰腺癌吉西他滨

耐药中的作用机制的探究，以及如何准确地检测Wnt/β-catenin信号通路

相关基因的表达水平。

三、研究方法与技术路线

本研究将采取以下方法和技术路线：

（1）细胞培养和细胞系选择：使用常规方法培养人胰腺癌细胞株

SW1990、AsPC-1和BxPC-3，筛选出具有吉西他滨耐药性的细胞株。

（2）建立吉西他滨耐药模型：使用MTS法或MTT法检测吉西他滨

对胰腺癌细胞增殖的影响，确定各细胞株对吉西他滨的敏感性，筛选并

确立不同浓度吉西他滨对胰腺癌细胞株的耐药模型。

（3）Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达水平检测：使用实时定

量PCR和Westernblot检测基因的表达水平，并结合免疫组化及免疫荧

光染色进一步验证结果。

（4）观察Wnt/β-catenin信号通路激活后对吉西他滨的影响：使用

siRNA、抑制剂等方法抑制或激活Wnt/β-catenin信号通路，检测吉西他

滨敏感和耐药胰腺癌细胞株的增殖、凋亡和迁移能力变化，探究Wnt/β-

catenin信号通路对吉西他滨的耐药机制及调控机制。

四、研究预期结果

（1）首次建立胰腺癌细胞吉西他滨耐药模型；

（2）探究Wnt/β-catenin信号通路在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用

机制，为防治胰腺癌提供新的治疗策略和思路；

（3）发表一篇高质量的SCI论文，提高研究组和单位的学术声誉。