丙肝病毒实验室检查方法及结果解释 .pdf

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丙肝病毒实验室检查方法及结果解释

1实验室检查方法

1.1化学发光实验化学发光免疫分析是将有高灵敏度的化学发光检测技术与

高特异性免疫反应相结合利用各种抗原,半抗原、抗体、激素,酶、脂肪酸、维

生素和药物等的检测分析技术。化学免疫发光又以标记方法不同分为两种,化学

发光标记免疫分析和化学发光酶免疫分析。化学发光标记免疫分析是利用化学发

光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法,常用的标记化学物质有吖啶酯类化合

物,通过起动发光试而发光,强烈直接发光在1s内完成。化学发光酶免疫分析,

其操作步骤与ELISA完全相同。以酶标记活性物质进行免疫反应,只是反应底

物为发光剂。

1.2胶体金快速实验免疫渗透实验:斑点免疫胶体金快速实验以硝酸纤维膜

为载体,HCV抗原点状固定在膜上,加待检样品,阳性结果在膜上抗原部位显

色斑点。反应时间在10min以内有效试验质控点必需显色。免疫层析试验,以

硝酸纤维膜为载体,HCV抗原线状固定在膜上,待检样品沿着载体迁移,阳性

结果在膜抗原部位显示出有色条带,有效试验质控线必须显色。

1.3抗体补充试验目前常用抗体补充试验为免疫印迹试验,免疫印迹法试剂

一般将HCV不同编码区抗原多种成分喷涂在硝酸纤维薄膜条上,并设置了两种

不同浓度的IgG对照带的二条hsoD对照带,用于内部对照结果判断。其诊断

HCV感染敏感性高,特异性强,可检测出针对HCV不同编码区抗原的抗体,其

不需要特殊仪器设备。

抗HCV检测策略及结果报告,先用筛查试剂进行初策实验,结果呈阴性报

告阴性,不在进行复检实验,结果呈阳性反应进入复检试验,复检用筛查试剂2

进行,结果呈阴性反应报告阴性,呈阳性反应报告抗HCV阳性。

HCV抗原的检测目的及意义:急性丙型肝炎的辅助诊断,尤其有助于HCV

感染窗口期患者,抗HCV检测结果确定患者或HCV阳性母亲所生婴儿丙型肝

炎辅助诊断。免疫受损或先天性免疫缺陷群体如HCV感染者的筛查,或是抗HCV

阳性感染者的病毒血液分析,HCV感染者治疗前后,病毒血液分析。

HCV抗原检测方法,采用ELiSA试剂定性或定量检测样品中游离的HCV

核心抗原或总核心抗原。HCV抗原检测策略及报告,初次检测样品阴性则报告

为阴性,阳性需进行双孔复检,如双孔为阴性报告为阴性,双孔至少有一孔阳性

报告阳性。

丙型肝炎病毒核酸的检测其目的和意义:HCVRNA定性检测可用于血液筛

查领域,可使用单份样品或者多份样品集合的方法,对献血员的血液进行核酸检

测,降低输血残余风险度,HCVRNA检测可用于对HCV抗体阴性的高危人群样

品进行核酸检测及发现窗口期的感染。HCVRNA定量检测主要用于抗病毒治疗

及疗效判定。HCVRNA检测方法有:RTPCR检测技术,TMA检测技术,实时

荧光定量PCR技术,PDNA技术。

2检测策略及结果报告

2.1HCV核酸定性用于血液测查的策略及结果报告。

对血液HCV抗体阴性样品可用结合NAT进行复检实验,如是阳性反应做单

人份的NAT检测。阳性结果报告阳性待查!血液报废,如果需要进一步献血员

感染状况,执行临床诊断策略,如果阴性报告复检阴性,血液供应临床。

2.2HCV核酸定性检测用于临床诊断结果报告,抗HCV复检实验阳性反应

样品,进行定性NAT实验。结果阳性者,报“HCV阳性”定性NAT结果阴性,

须做免疫印迹实验确证。

HCV基因型的检测主要用于HCV病毒基因分型,我国主要为1b,其次为

2a,还有其他少见的型别,如西南地区的3型和广东地区的6型等,基因分型的

检测主要用于抗病毒治疗的应答·不同,采取治疗方案也不同,对于RNA定量结

果有一定影响。

丙型肝炎病毒的细胞培养:建立体外丙型肝炎病毒的临床检测及治疗方案的

优化和个性化治疗至关重要。但现在还不能用于

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