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无症状高尿酸血症动物模型的建立及初步研究

目的：建立新型的无症状高尿酸血症小鼠模型。方法：选取雄性尿酸氧化

酶基因敲除杂合子C57BL/6J小鼠和野生型C57BL/6J小鼠各20只，两类小鼠均

按随机数字表法分为对照组和模型组，每组各10只，模型组给予高酵母饲料饲

养并予以氧嗪酸钾盐悬液（1次/d，250mg/kg）腹腔注射。分别于造模前和造模

后第1、2、3、4周时鼠尾静脉取血检测小鼠血清尿酸水平（UA），并于造模后

第5周取小鼠肾脏行病理切片及HE染色。结果：造模1周后，两模型组小鼠血

清尿酸水平均较对照组明显升高，且杂合子模型组尿酸水平明显高于野生型模型

组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05），但肾脏病理切片HE染色显示，两种

小鼠对照组和模型组均无明显病理变化。结论：以高酵母饲料饲养并予以氧嗪酸

钾盐悬液腹腔注射处理的尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠所构建的高尿酸血症动

物模型具有尿酸值高，模型稳定的特点，为较理想的小鼠高尿酸血症动物模型。

尿酸是人类嘌呤代谢的最终产物。在约1500万年前人类由于基因突变失去

了尿酸氧化酶基因[1]，因此人类的尿酸水平高于其他物种，这种改变有利于人

类适应当时的生存环境，但尿酸水平仍控制在一定范围内。现在所谓的高尿酸血

症（hyperuricemia）是指嘌呤代谢紊乱和/或尿酸排泄障碍导致的血尿酸水平增高

[2]。随着人们生活水平的提高及饮食结构的变化，高尿酸血症的发病率日渐增

高[3-4]，由于雌性激素的作用尿酸水平在男性中比绝经前女性更高[5-6]。高尿酸

血症动物模型，是研究高尿酸血症及筛选降尿酸药物的重要工具[7-9]。目前尚未

见尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠制作高尿酸动物模型的报道，本实验对尿酸氧化

酶基因敲除杂合小鼠进行高酵母饲养及氧嗪酸钾悬液腹腔注射处理，观察其血清

尿酸等指标，目的在于获得尿酸值较高且稳定的理想高尿酸血症动物模型。1材

料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物选择以C57BL/6J小鼠为背景的尿酸氧化酶基因敲除杂合子

小鼠（基因型为Uox+/-）20只及野生型C57BL/6J小鼠（基因型为Uox+/+）20

只，均为雄性，6～8周龄，体质量18～25g，尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠构

建于上海南方模式生物研究中心，由本院实验动物中心SPF级动物饲养房饲养。

1.1.2仪器和试剂日本东芝TBA-40FR全自动生化分析仪；Nikon90i显微

镜；高酵母饲料（北京科澳协力饲料有限公司）；氧嗪酸钾盐（美国Aldrich公司）。

1.2实验方法

1.2.1动物分组及建模杂合小鼠及野生型小鼠适应性饲养7d后，按随机数

字表法分别分为对照组和模型组，每组10只。模型组小鼠予以高酵母饲料饲养

及氧嗪酸钾悬液腹腔注射（1次/d，250mg/kg），对照组小鼠饲以普通小鼠颗粒

饲料，并给予同体积蒸馏水腹腔注射。

1.2.2观察指标与测定方法杂合小鼠和野生型小鼠均分别于造模前和造模

后第1、2、3、4周时鼠尾静脉取血，室温下静置1h后，3500rpm，4℃离心

15min，收集血清，应用全自动血液生化仪检测记录血尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、

肌酐（CR）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CH）、谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨

酶（AST）的水平，并对所得数据进行分析。

1.2.3病理切片及HE染色造模第5周将小鼠麻醉后，迅速打开腹腔，取肾

脏，置于4%的甲醛溶液中固定，脱水，常规石蜡包埋，包埋后肾脏纵切以观察

肾门、肾盂结构，苏木素-伊红染色，封片，于Nikon90i显微镜下观察组织切片。

1.3统计学处理采用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析，计量资料均以

（x±s）表示，比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1四组小鼠不同时期血尿酸水平比较造模前，各组小鼠血尿酸水平比较

差异无统计学意义（P0.05）。造模1～4周，杂合子模型组小鼠血尿酸水平与造

模前比较均明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。野生型模型组小鼠血尿

酸水平1～4周也明显升高，与给药前比较差异有统计学意义（P＜0.05）；两模

型组小鼠血清尿酸水平均高于对照组（P＜0.05）；杂合子模型组小鼠与野生型模

型组小鼠组比较，造模后1～4周尿酸水