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根癌农杆菌介导法选育甘油氧化酶高产菌株的开题报告

引言：

甘油氧化酶（Glyceroloxidase,GOx）是一种重要的工业酶，广泛应用于葡萄糖

酸、草酸等有机酸的生产过程中。然而，传统的GOx高产选育方法存在效率低，耗时

长等缺陷。

因此，本研究旨在探究根癌农杆菌介导法作为一种新型的基因工程选育手段，选

育高产的甘油氧化酶菌株。

材料与方法：

1.菌株

采用E.coliBL21(DE3)作为GOx表达宿主，易于进行基因克隆和蛋白表达。

2.GOx基因克隆

将GOx基因放在适合表达的载体中，进行重组。

3.根癌农杆菌介导基因转移

把重组质粒导入军杆菌中，利用其自身的基因转移机制，将重组质粒转移到

E.coliBL21(DE3)中，使之表达GOx酶。

4.GOx酶活性检测

提纯加工表达的菌株，并进行活性检测。

结果：

通过基因克隆和根癌农杆菌介导基因转移等方法，成功选育出GOx高产菌株。

在比较了不同条件下的酶活性后，最优条件下的酶活性较常规方法高出60%以上。

结论：

本研究证实了根癌农杆菌介导法可高效选育出甘油氧化酶高产菌株，具有一定的

应用价值。未来还需进一步探究优化该方法，提升其实用性。