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ICS11.120.10
C23
团体标准
T/CACM1027.104—2018
铁皮石斛PCR鉴定
PCRidentificationofDendrobiiOfficinalisCaulis
2018-11-19发布2018-11-19实施
中华中医药学会发布
T/CACM1027.104—2018
目次
前言III
1范围1
2规范性引用文件1
3术语和定义1
4方案2
5仪器设备2
5.1离心机2
5.2金属浴2
5.3制冰机2
5.4涡旋振荡器2
5.5超纯水发生器（分子生物学级别）2
5.6高压灭菌锅2
5.7PCR仪2
5.8电泳仪及其附件2
5.9凝胶成像仪2
5.10核酸蛋白仪2
5.11电子天平（感量0.01g）3
5.12连续可调微量移液枪3
5.13低温冰箱3
5.14其他3
6试剂和溶液配制3
6.1概述3
6.2三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）溶液3
6.30.5mol/L乙二胺四乙酸（EDTA）溶液3
6.4前处理缓冲液3
6.5CTAB提取缓冲液3
6.6脱氧核糖核苷三磷酸dNTP混合液3
6.710×PCR缓冲液3
6.8不含3’→5’外切酶活性的Taq酶（5U/μL）4
6.9铁皮石斛检测用引物对序列4
6.10引物溶液4
6.11琼脂糖（电泳纯）4
6.12DNA分子量标准4
I
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6.1350×TAE电泳缓冲液4
6.146×上样缓冲液4
7检验程序4
7.1概述4
7.2取样4
7.3粉碎5
7.4DNA提取5
7.5PCR扩增5
7.6扩增产物检测6
8结果判定6
8.1荧光染料显色检测6
8.2琼脂糖凝胶电泳检测6
9结果报告6
9.1一般要求6
9.2鉴定报告6
10质量保证7
11废弃物处理7
附录A（规范性附录）多糖、多淀粉类中药及种子种苗DNA提取方法8
附录B（资料性附录）铁皮石斛鉴定PCR反应体系的建立10
参考文献18
II
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