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饲用微生物制剂中凝结芽孢杆菌的检测
1范围
本标准规定了饲用微生物制剂中凝结芽孢杆菌的检测方法。
本标准适用于含有益微生物凝结芽孢杆菌的各种饲料添加剂中凝结芽孢杆菌的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008/ISO3696：1987，MOD）
GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定
GB/T14699.1饲料采样（GB/T14699.1-2005/ISO6497：2002，IDT）
GB/T20195动物饲料试样的制备（GB/T20195-2006/ISO6498：1998，IDT）
3培养基和材料
实验用水参照标准：分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008/ISO3696：1987，MOD）
3.10.85%灭菌生理盐水
3.2自制改良营养琼脂培养基(NA)：参见附录A中的A.1
3.3革兰氏染色液：参见附录A中的A.2
3.4细菌生化鉴定试剂盒
3.5细菌基因组DNA提取试剂盒
3.6标准菌株：凝结芽孢杆菌CICC21736
4主要仪器设备和玻璃器皿
4.1恒温培养箱：50℃±1℃
4.2恒温水浴锅：80℃±1℃
4.3普通冰箱
4.4天平：感量为0.1g、0.01g、0.0001g
4.5振荡器或漩涡混合器
4.6显微镜：1000倍
1
4.7pH计：精确度0.1
4.8无菌玻璃或塑料培养皿Φ=90mm、无菌锥型瓶、无菌玻璃或塑料涂布棒
4.9量筒：250mL
4.10PCR仪
4.11电泳仪
4.12凝胶成像仪
4.13移液器：量程10μL、100μL、1000μL、10000μL
5检验程序
凝结芽孢杆菌检验程序见下图。
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