AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细胞免疫组织化学观察.pdfVIP

AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细

胞免疫组织化学观察

孙红亚;唐军民;唐岩;甄昱;盛树青

【摘要】目的观察氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)所致大鼠结肠癌形成过程

中,大鼠脑垂体远侧部ACTH细胞的免疫组织化学变化并探讨其意义.方法用断乳

SD(SpragueDawley)雄性大鼠30只,分为AOM实验组和盐水对照组.用

AOM(15mg/kg)每周腹腔注射,连续2周,诱导大鼠结肠癌的形成.分别于实验第10、

30、34周取材,用免疫组织化学、图像分析法观察大鼠实验性结肠癌形成过程中脑

垂体远侧部ACTH阳性细胞的变化.结果亚甲基蓝染色光镜下观察,可见AOM腹腔

注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝(aberrantcrypt,AC)和异常隐窝灶(aberrant

cryptfoci,ACF).免疫组织化学显示,与同期正常对照组相比,对照组大鼠垂体远侧部

ACTH阳性细胞阳性反应显著性增强(P0.01).结论在大鼠实验性结肠癌形成过程

中脑垂体远侧部ACTH细胞可能参与了机体抗肿瘤的内分泌调节.

【期刊名称】《泰山医学院学报》

【年(卷),期】2008(029)010

【总页数】4页(P747-750)

【关键词】结肠癌;垂体;ACTH阳性细胞;大鼠;氧化偶氮甲烷

【作者】孙红亚;唐军民;唐岩;甄昱;盛树青

【作者单位】扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室,江苏,扬州,225001;北京大学

基础医学院组织学与胚胎学教研室,北京,100083;北京大学基础医学院组织学与胚

胎学教研室,北京,100083;北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,北

京,100083;扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室,江苏,扬州,225001

【正文语种】中文

【中图分类】R730.23

机体是一个统一整体，通过神经-内分泌-免疫系统调节网络使得各组织、器官和系

统的生理活动相互协调、相互制约，维持着机体的稳态，这是机体自然抗病的基础。

肿瘤的发生、发展与机体的内分泌调节密切相关[1，2]，而垂体是机体调节网络的

重要组成部分，因此，本实验以实验性大鼠结肠癌为动物模型，观察脑垂体远侧部

ACTH阳性细胞的免疫组织化学变化，为脑垂体参与机体抗肿瘤提供参考资料。

1材料和方法

1.1试剂

氧化偶氮甲烷(azoxymethane，AOM)，由美国田纳西大学Williams教授馈赠，

美国Sigma公司产品)。生理盐水配制，终浓度为1.25g/L。兔抗人ACTH多克

隆抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司产品)。

1.2动物及分组

三周龄断乳SD雄性大鼠30只，体重45～50g/只，由北京大学医学部实验动物

科学部提供。随机将大鼠分为实验组和正常对照组，每组15只。

1.3模型建立及取材

实验组(于第5、6周腹腔注射AOM，15mg/kg)、正常对照组(不给AOM而注

射同等液体量的0.9%无菌性生理盐水)。分别于实验第10、30、34周取材，每期

各组取5只大鼠。10%水合氯醛(2ml/kg体重)腹腔注射后取材，取结肠和脑垂体。

垂体用Bouin液固定，石蜡切片厚5μm备用。大鼠整段结肠用10%中性福尔马

林液固定后，用0.2%亚甲基蓝分段对大鼠结肠黏膜进行染色，解剖显微镜下计数

异常隐窝(aberrantcrypt，AC)及异常隐窝灶(aberrantcryptfoci，ACF)，以确

定大鼠结肠癌建模成功。结肠和垂体石蜡切片常规H-E染色，垂体曼氏(Mann’s)

染色，均中性树胶封片。

1.4免疫组织化学

免疫组织化学SP(Streptavidin-peroxidase)法染色：垂体切片脱蜡至水；3%蒸

馏水-H2O2液封闭内源性过氧化物酶活性；加ACTH抗体工作液(浓度为1∶100)，

过夜后加生物素标记的第二抗体工作液；加辣根过氧化物酶标记链霉卵白素复合物

工作液；常