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炎症相关性结直肠癌小鼠模型建立及血管生成抑制因子1在结直肠

癌中的表达

目的探讨炎症相关性结直肠癌小鼠模型的建立，及血管生成抑制因子1

（VASH-1）在结直肠癌中的表达。方法将雄性小鼠（C57BL/6）30只按体重

大小随机分为两组。A组给予氧化偶氮甲烷（AOM）10mg/kg右侧腹腔注射，

后于第1、4、7周给予1.5%～2.5%葡聚糖硫酸鈉（DSS）自由饮用7d，其余时

间自由饮清水。B组给予生理盐水0.1mL/10g右侧腹腔注射，此后给予清水自

由饮用。均在第10周末处死小鼠，查看成瘤情况。免疫组织化学染色法探讨

VASH-1在结直肠癌组织中的表达。结果造模结束后A组成瘤率为53.33%，

病理提示为腺癌，B组成瘤率为0.00%，两组成瘤率比较差异有统计学意义（P

5%～25%为1分，25%～50%为2分，50%～75%为3分，75%为4分；着色

强度记分：不着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。总分=

细胞阳性率记分×着色强度记分。总分≤0分为阴性，1～4分为弱阳性，5～8分

为阳性，9～12分为强阳性。

1.5统计学方法

采用统计软件SPSS17.0处理数据。计数资料采用χ2检验，计量资料以均

数±标准差（x±s）表示，采用t检验，以P0.05）。腹腔注射药物当时B组死亡

1只，第1周的第4天A组小鼠逐渐出现便血情况，第6天A组死亡1只，第7

天A组死亡2只，解剖后观察肠腔内可见残留血液。第8周A组死亡1只，B

组死亡2只，解剖后结直肠内未见肿瘤及出血。

2.2造模成瘤情况

A组8只小鼠可见肿瘤生长，成瘤率为53.33%，病理提示为腺癌，见图1。

B组未见肿瘤生长，成瘤率为0.00%，两组成瘤率比较差异有统计学意义（P

0.05）。

2.3VASH-1表达情况

VASH-1在结直肠癌组织中高表达，在正常结直肠组织中低表达，见图2（封

三）。A组中阳性表达9只，强阳性表达2只，阴性表达及弱阳性表达0只，阳

性表达率为100%。B组中阴性表达9只，弱阳性表达2只，阳性表达1只，阳

性表达率为25%。两组比较差异有统计学意义（P0.05）。

3讨论

结直肠癌是常见的恶性肿瘤，其发生部位常见于直肠，其次是乙状结直肠，

结直肠癌的发生与多种因素有关，比如遗传、高脂肪饮食、炎症性肠病等。炎症

性肠病在亚洲发病率成上升趋势，那么由此导致的结直肠癌就不容忽视，而动物

实验是研究炎症相关性结直肠癌的常用方法。关于炎症性肠病导致结直肠癌的动

物研究模型常用AOM+DSS来造模，其造模成功率较高[5]。AOM是致癌物，可

导致远端结直肠肿瘤，DSS可以诱导结直肠炎症，从而加速肿瘤的形成，用

AOM+DSS来进行结直肠癌动物模型建立能反映炎症性肠病相关性的结直肠癌

情况[6]。

基于导致结直肠癌发生的原因有很多，已有大量文章报道了多种基因与结直

肠癌发生有关，一些基因敲除后可导致或抑制结直肠癌的发生，包括APC、IL-10、

Myd88[7-9]、TLR4[10]等。本研究观察炎症相关性结直肠癌模型的建立，为剔除

上述原因干扰，我们应用了C57BL/6野生型小鼠为实验对象。同时也已有文献[11]

报道了在AOM/DSS诱导小鼠炎症相关性结直肠癌的模型中，雌激素可促进结直

肠癌的形成，所以在本研究中仅应用雄性小鼠造模来剔除雌性激素的干扰。Day

等[12]报道了高脂肪饮食导致的结直肠癌可能由炎症介导，本研究中小鼠的食物

剔除高脂肪作用。

本研究采用了AOM和DSS来建立结直肠癌模型，AOM腹腔注射1次，此

后行3个周期的1.5%～2.5%DSS口服，为自由饮用，造模时间为10周，达到的

成瘤率为53.33%，瘤體大小中等，完全能够达到实验所用标本数量的要求，也

有学者[6]报道了应用AOM腹腔注