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荧光光度计原理
荧光光度计是一种用于测量物质发光强度的仪器,其原理基于
荧光现象和分光光度学原理。荧光是指在某些物质吸收能量后,
激发至高能级,然后从高能级返回基态时放出能量的过程。这
种能量损失的过程会以光的形式发出,并具有特定的波长和强
度。
荧光光度计的工作原理如下:
1.激发:荧光光度计通过使用适当的激发源(如氙灯或激光器)
产生特定波长的激发光,该波长通常与待测物质吸收光的波长
相对应。
2.滤光:通过使用适当的滤光片或光栅,荧光光度计将只允许
特定波长的光通过,并滤除其他波长的光。
3.激发光照射:通过镜子或透镜系统,荧光光度计将激发光照
射到待测物质上。
4.荧光发射:待测物质吸收激发光后,从高能级返回基态时将
发出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长长,并且具有特定
的荧光光谱特征。
5.检测:通过光电检测器(如光电二极管或光电倍增管)将荧
光信号转换为电信号。光电检测器的灵敏度和响应特性与荧光
光谱相匹配。
6.信号处理:荧光信号通过放大器和/或滤波器进行处理,并
转换为数字信号以进行后续数据处理和分析。
7.数据显示和分析:荧光光度计通常配备显示屏,可直接显示
测量结果。此外,可以使用计算机和相关软件对数据进行更详
细的分析和处理。
总结而言,荧光光度计利用激发光激发待测物质,测量其发出
的荧光强度以获得相关的信息。相较于传统吸光光度计,荧光
光度计具有更高的敏感度和选择性,因此,在生物学、化学分
析等领域得到了广泛应用。
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