调节基因11剪切体的克隆表达和功能研究的开题报告 .pdfVIP

乙型肝炎病毒X蛋白反式调节基因11剪切体的克隆表达和

功能研究的开题报告

一、研究背景

乙型肝炎病毒（HBV）是一种世界范围内广泛存在的病毒，它引起的肝炎病毒感

染严重影响人类健康。HBV感染导致肝脏炎症、坏死、纤维化和肝癌等严重后果。乙

肝病毒X蛋白（HBx）在HBV感染中扮演着关键的作用，它参与了病毒的复制、转录

和肝癌的发生等多个生物学过程。然而，目前尚不清楚HBx蛋白的详细分子机制和功

能。

HBx蛋白的剪切体形式是一种已知的功能结构抑制物，可逆调节多个剪切酶和翻

译调节因子，从而将跨膜、细胞质和核内靶位点的mRNA的生成和代谢稳态平衡调控

在细胞内。反式调节基因11（RSF11）是一种组蛋白去乙酰化酶蛋白，其过度表达与

肝癌的发生和发展有关。有研究表明，RSF11可直接与HBx相互作用，可能是HBx剪

切体结构的组成部分。因此，研究HBx剪切体和RSF11相互作用的分子机制可以深入

了解乙肝病毒感染的生物学过程和肝癌的发生机制。

二、研究目的

本研究旨在克隆表达人类HBx反式调节基因11剪切体，进一步探究其对HBV感

染和肝癌发生的调控作用。具体研究目的如下：

1.克隆HBx反式调节基因11剪切体的相关基因和蛋白序列。

2.构建HBx-RSF11互作的表达载体并进行转染。

3.分析HBx-RSF11互作的影响，探究其对HBV感染和肝癌发生的作用。

三、研究方法

1.克隆HBx反式调节基因11剪切体的相关基因和蛋白序列。

根据GenBank数据库的相关信息，设计HBx反式调节基因11剪切体的引物并进

行PCR扩增。将PCR产物进行测序和分析，确保其正确性。

2.构建HBx-RSF11互作的表达载体并进行转染。

将RSF11基因和HBx基因分别克隆到表达载体中，并构建带有不同标签的融合

蛋白。将不同标签的重组蛋白转染入细胞中，采用共免疫印迹和免疫共沉淀等手段，

检测其相互作用。

3.分析HBx-RSF11互作的影响，探究其对HBV感染和肝癌发生的作用。

采用RNA干扰或过量表达的方式调控RSF11的表达水平，分析RSF11的表达对

HBV复制和肝细胞的增殖和凋亡的影响。通过病例的临床数据分析以及肝癌细胞模型

的体内和体外实验，研究HBx-RSF11互作的调节机制和相关生物学功能。

四、研究意义

本研究对于深入了解HBx剪切体和RSF11相互作用的分子机制具有重要意义。

通过分析RSF11的表达对HBV复制和肝癌发生的影响，可以为HBV感染和肝癌发生

的研究提供新的思路和证据。此外，本研究还将为肝癌的防治提供理论基础，为研发

新的肝癌治疗方法提供参考。