泛素连接酶LRSAM1对人神经胶质母细胞瘤细胞生物学行为的影响及其可能.pdfVIP

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•456•20215355JChinPractDiagnTher,May2021Vol.35No.5

中华实用诊断与治疗杂志年月第卷第期,,

•论著•

泛素连接酶LRSAM1对人神经胶质母细胞瘤细胞

生物学行为的影响及其可能机制

梁博,王新军,王建业,周少龙,杨卓,刘荣俊

郑州大学第五附属医院神经外科,河南郑州450052

摘要:目的探讨泛素连接酶LRSAM1在CD166降解中的作用及其对人神经胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影

响。方法人神经胶质母细胞瘤U-87MG细胞,采用免疫共沉淀法检测LRSAM1与CD166是否存在结合;将对数生

UMGpcDNA3.1-LRSAM1pcDNA3.1-NCpcDNA3.1-LRSAM1

长期-87细胞分为组、组和空白对照组,组和

pcDNA3.1-NC组细胞分别转染pcDNA3.1-LRSAM1质粒载体和PcDNA3.1空质粒载体,空白对照组细胞正常培养,采

PCR3LRSAM1mRNAWesternblotLRSAM1

用实时荧光定量法检测组细胞相对表达量,采用法检测蛋白相对表达

量,采用免疫荧光染色法检测LRSAM1与CD166表达情况,采用细胞克隆形成实验检测细胞集落形成数目,采用

ArmexinV-FITC/PITnmswell

染色检测细胞凋亡率,采用细胞划痕试验检测细胞划痕愈合率,采用小室实验检测侵袭

细胞数。结果U-87MG细胞中LRSAM1与CD166存在结合。pcDNA3.1-LRSAM1组细胞LRSAM1mRNA和蛋白

相对表达量3(.26士0.28、0.72±0.06)均髙于空白对照组(1.00±0.03、0.18±0.0.1)和pcDNA3.1-NC组0(•99士0.02、

0.19±0.02)(P0.05)U-87MGLRSAM1CD166pcDNA3.1-LRSAM1LRSAM1

,转染成功。细胞与共定位,

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