RNAi抑制胃癌VEGF-C基因表达与淋巴管生成的实验研究的开题报告.pdfVIP

RNAi抑制胃癌VEGF-C基因表达与淋巴管生成的实验研

究的开题报告

一、研究背景

胃癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤，其发生发展与多种因素有关，其中包括了

肿瘤微环境的改变。VEGF-C是一种重要的促进肿瘤淋巴管生成的因子，其过度表达已

被证明在多种肿瘤的发生和恶化中起到至关重要的作用。因此，VEGF-C成为了胃癌治

疗的新靶点，其阻断可以抑制肿瘤的淋巴管生成和转移，从而提高治疗效果和预后。

近年来，RNA干扰技术已经成为研究分子生物学和细胞生物学的重要手段，在胃癌治

疗中也被广泛的应用。因此，本研究旨在探究RNAi技术对胃癌VEGF-C基因表达和淋

巴管生成的抑制效果，为胃癌治疗提供新思路和新方法。

二、研究目的

1、建立胃癌细胞系中VEGF-C基因的RNAi抑制模型

2、分析RNAi技术抑制VEGF-C基因表达对胃癌细胞生长、增殖、凋亡和细胞周

期的影响

3、分析RNAi技术抑制VEGF-C基因表达对胃癌淋巴管生成能力的影响

4、探究RNAi技术应用于胃癌VEGF-C基因治疗的可行性和临床应用前景

三、研究方法

1、建立胃癌细胞系中VEGF-C基因的RNAi抑制模型

采用siRNA转染法，对胃癌细胞株转染VEGF-C特异性siRNA和对照siRNA，通

过Westernblot和RT-PCR检测VEGF-C基因表达水平的变化，确定转染效果和抑制效

果。

2、分析RNAi技术抑制VEGF-C基因表达对胃癌细胞生长、增殖、凋亡和细胞周

期的影响

采用MTT法、CCK-8法和流式细胞术检测细胞生长和增殖情况，采用流式细胞

术检测细胞凋亡情况，采用细胞周期分析法检测细胞周期分布变化。

3、分析RNAi技术抑制VEGF-C基因表达对胃癌淋巴管生成能力的影响

将VEGF-C-siRNA和对照-siRNA转染至胃癌细胞，收集细胞上清液和培养液，采

用ELISA法检测VEGF-C及VEGF-D的表达水平；采用基质金属蛋白酶-9（MMP-9）酶

测定法、细胞迁移实验及小鼠淋巴管生成实验检测VEGF-C-siRNA对胃癌细胞淋巴管生

成的抑制效果。

四、研究意义

本研究将RNAi技术应用于胃癌VEGF-C基因治疗，探究其对胃癌细胞生长、增

殖、凋亡、细胞周期及淋巴管生成能力的影响，为胃癌治疗提供新思路和新方法。此

外，本研究的结果还可以为基础研究提供新的理论依据和数据支持，推动RNAi技术和

肿瘤治疗的进一步发展。