Tβ4融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其纯化的开题报告 .pdfVIP

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Exendin-4/Tβ4融合蛋白原核表达载体的构建、表

达及其纯化的开题报告

尊敬的评委和各位专家:

本次开题报告介绍的是“Exendin-4/Tβ4融合蛋白原核表达载体的构

建、表达及其纯化”。本项目的目的是构建Exendin-4/Tβ4融合蛋白原

核表达载体,并进行表达及纯化,为后续的生物学研究奠定基础。

Exendin-4是一种治疗2型糖尿病的药物,它通过增强胰岛细胞的胰

岛素分泌来降低血糖。Tβ4是一种多功能肽,具有促进细胞增殖、迁移、

重生等生物学功能,且能够抑制炎症反应和细胞凋亡。将Exendin-4和T

β4融合在一起,可以发挥两种肽的生物学功能,具有治疗糖尿病和其他

疾病的潜力。

本项目将使用PCR技术构建Exendin-4/Tβ4融合基因,并将其克隆

到原核表达载体pET-28a中。该载体具有强大的诱导表达能力,并且能

够添加His标签,方便后续纯化。将构建好的载体转化到大肠杆菌中进行

表达,通过SDS等方法检测表达情况。

融合蛋白的纯化是本项目的重要环节。我们计划使用His-Tag亲和

层析技术进行纯化,根据蛋白的理化性质和组分,选择适当的条件进行

纯化。使用Westernblot、质谱等逐步确认纯化效果,并对蛋白的生物学

特性进行初步研究。

通过本项目,可以获得Exendin-4/Tβ4融合蛋白的原核表达和纯化

方法,并初步研究其生物学特性,为后续的研究奠定基础。

谢谢大家的听取!

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