萤火虫荧光素酶标记结直肠癌模型的建立 .pdfVIP

湖北工业大学学报2021年04月

Vol.36No.2JournalofHubeiUniversityofTechnologyApr.2021

［

文章编号684（）6-04

］1003—4202102-004

萤火虫荧光素酶标记结直肠癌模型的建立

，，，，，，

杨俊寒段海潇张紫怡王润杨刘滨磊胡翰汪洋

，430068）

湖北工业大学生物工程与食品学院湖北武汉

（

［要）Firefly）

摘］针对小鼠结直肠癌细胞（构建能够稳定表达萤火虫荧光素酶lucifcrascCFIuc以及具有嘌吟

CT26

CT26-Fluc细胞株，并建立其荷瘤鼠模型Firefly基因片段整合至转

霉素抗性的。采用同源重组技术将luciferase

将所得质粒转染进人CT26原始细胞株，

座子系统中得到质粒，使其在该细胞内表达。后通过细胞敏感性实验获得

最低致死浓度，CT26-Fluc单克隆细胞系CT26-Fluc单克

CT26筛选获得稳定表达荧光素酶的。流式细胞仪检测

隆的纯度。同时利用显微观察等方法证实细胞增殖和细胞形态与CT26原始细胞系不存在显著差异。将构建成功

植人BALB/c，，

的CT26-Fluc小鼠右后侧背部皮下通过小动物活体成像仪验证该细胞系能稳定表达荧光素酶且

能够用于小鼠结直肠癌成瘤模型本实验成功构建了稳定表达Fireflyluciferase的CT26-Fluc为小鼠结

。细胞系，

直肠癌模型及其病灶转移机制的研究建立了技术基础。

［］小鼠结直肠癌细胞；

关键词萤火虫荧光素酶荧光成像

；

中图分类号R153［A

［］文献标识码］

死亡率

结直肠癌作为消化道的恶性肿瘤之一，最后发射光子将表达Fluc的基因转入到真核

位居所有癌症第」在中老年人群中发病率极

4位1［，细胞中使其能稳定表达，且不影响细胞正常生

高，。遗憾的是，长。由于其发射的光子可以被仪器捕捉记录,因

且每年发病率都有增加