人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和表达的开题报告.pdfVIP

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人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和

表达的开题报告

开题报告

题目:人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和表达

一、研究背景

心血管疾病是目前世界上最主要的致死原因之一,其中冠心病是一

种常见的心血管疾病,是由于心脏冠状动脉供血不足导致心脏缺血而引

起的一系列病变。CITED2是一种蛋白质转录因子,已被证实在胚胎发育

和心肌细胞分化中发挥重要作用,并被认为是心脏疾病的潜在治疗靶点。

此外,已经报道了CITED2的两种突变型与心脏发育缺陷之间的关联。

二、研究目的

本研究旨在构建并表达人CITED2野生型和两种突变型真核表达质

粒,以探究它们在心肌细胞分化和心脏发育中所起的作用,并为心脏疾

病的临床研究提供理论基础。

三、研究内容

1.从人体细胞中提取RNA并逆转录成cDNA,扩增人CITED2野生

型和两种突变型基因序列。

2.将CITED2野生型和两种突变型基因序列克隆到真核表达质粒

pCMV-Tag2B中,构建CITED2野生型和两种突变型真核表达质粒。

3.验证构建的真核表达质粒是否准确,并通过Westernblotting等

方法检测CITED2野生型和突变型的表达情况。

4.进行心肌细胞分化实验和心脏发育相关的实验,观察不同类型

CITED2对心脏发育和心肌细胞分化的影响。

四、研究意义

本研究将建立一种诱导心肌细胞分化的体系,对人CITED2在心脏

发育和心肌细胞分化中的作用进行深入研究,并探索CITED2突变与心脏

发育缺陷的关联。同时,本研究的结果将为心脏疾病的临床治疗提供新

的理论基础和潜在治疗策略。

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