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人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和
表达的开题报告
开题报告
题目:人野生型和突变型CITED2真核表达质粒的构建和表达
一、研究背景
心血管疾病是目前世界上最主要的致死原因之一,其中冠心病是一
种常见的心血管疾病,是由于心脏冠状动脉供血不足导致心脏缺血而引
起的一系列病变。CITED2是一种蛋白质转录因子,已被证实在胚胎发育
和心肌细胞分化中发挥重要作用,并被认为是心脏疾病的潜在治疗靶点。
此外,已经报道了CITED2的两种突变型与心脏发育缺陷之间的关联。
二、研究目的
本研究旨在构建并表达人CITED2野生型和两种突变型真核表达质
粒,以探究它们在心肌细胞分化和心脏发育中所起的作用,并为心脏疾
病的临床研究提供理论基础。
三、研究内容
1.从人体细胞中提取RNA并逆转录成cDNA,扩增人CITED2野生
型和两种突变型基因序列。
2.将CITED2野生型和两种突变型基因序列克隆到真核表达质粒
pCMV-Tag2B中,构建CITED2野生型和两种突变型真核表达质粒。
3.验证构建的真核表达质粒是否准确,并通过Westernblotting等
方法检测CITED2野生型和突变型的表达情况。
4.进行心肌细胞分化实验和心脏发育相关的实验,观察不同类型
CITED2对心脏发育和心肌细胞分化的影响。
四、研究意义
本研究将建立一种诱导心肌细胞分化的体系,对人CITED2在心脏
发育和心肌细胞分化中的作用进行深入研究,并探索CITED2突变与心脏
发育缺陷的关联。同时,本研究的结果将为心脏疾病的临床治疗提供新
的理论基础和潜在治疗策略。
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