基因在人胃癌组织和细胞株中的表达及其意义 .pdfVIP

硕士学位论文中文摘要

摘要:

目的：本实验采用实时荧光定量PCR、WesternBlot法以及免疫

组化SP法分别检测fascin1在胃癌细胞及胃癌组织中的表达，进一

步分析fascin1的表达水平和胃癌患者临床病理参数的相关性，旨在

探讨其与胃癌发生、发展及预后的关系，为胃癌的基因治疗提供参考

数据。

方法：本实验由两部分组成：①将正常胃粘膜上皮细胞株GES-1，

不同分化胃癌细胞株MKN28、SGC-7901、MKN45分别种到25cm²

培养瓶，待细胞长到80%-90%融合时，选择生长状态良好的细胞进

行RNA和蛋白质的提取后，采用RT-qPCR检测以上四种细胞fascin1

mRNA的表达水平;WesternBlot法检测以上四种细胞中fascin1蛋白

的表达水平。②采用免疫组化SP法检测fascin1在80例胃癌组织标

本中的表达水平，同时取距离肿瘤组织5cm的癌旁正常胃粘膜20例

作为正常对照，并结合患者的临床病理参数统计分析这些参数与

fascin1之间可能的关系。

结果：（1）实验中提取的细胞RNA和蛋白质经过质量测定，均符

合实验要求。（2）实时荧光定量PCR和Westernblot分析法结果显示：

正常胃粘膜细胞及不同分化胃癌细胞株均有fascin1mRNA和fascin1

蛋白的表达；三组胃癌细胞的fascin1mRNA和fascin1蛋白的相对表达

量较正常胃粘膜细胞分别具有差异性，且差异具有统计学意义

（P0.05）；而在胃癌细胞中fascin1mRNA和fascin1蛋白的表达水平，

随着细胞分化程度的降低，逐渐的上调。(3)免疫组化显示fascin1阳性

表达主要位于胃癌细胞的胞浆和胞膜，胃癌间质中的血管内皮细胞亦

可见fascin-1阳性染色；在癌旁组织中,可见血管内皮细胞及淋巴组织

的树突状细胞中均呈阳性表达。fascin1在80例胃癌中的48例呈不同程

度的阳性表达，占58.75%，其中22例为（++-+++），占27.5%，其中

在20例癌旁5cm以上正常胃粘膜中有3例fascin-1弱阳性（+），而此20

例标本相应的胃癌组织中fascin1均有表达。比较fascin1在胃癌组织和

癌旁正常胃粘膜标本中的表达水平发现二者差异具有显著性（P＜

0.05）。进一步分析胃癌中fascin1的表达及其与临床病理相关指标的关

系发现，fascin1在未-低分化组的阳性表达率和表达强度高于高、中

分化组，在肿瘤的直径5cm标本中fascin1的表达高于直径≤5cm者（P

＜0.05），在胃癌伴远处转移的病例fascin1的表达率相对较高，且

fascin1的表达水平与胃癌的TNM分期相关，胃癌患者的TNM分期越

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晚，fascin1表达越高（P＜0.05），fascin1的表达仅与胃癌组织的分化

程度、肿瘤直径、淋巴结转移远处转移和TNM分期有关，而与肿瘤

位置、年龄、性别没有显著相关性。

结论：本研究发现fascin1的表达与胃癌的分化程度、肿瘤直径、

淋巴结转移、远处转移及TNM分期显著相关，与患者年龄、性别没

有相关性。以上结论说明fascin1在胃癌浸润和恶性转移中可能起一定

的病理作用，为胃癌的基因治疗提供参考数据，针对fascin1的靶向治

疗可能使化疗耐药、fascin1阳性患者好得较好的疗效。

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cDNAcomplementaryDNA互补脱氧核糖核酸

mRNAmessengerRNA信使RNA