埋线预处理对ZDF大鼠缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究 .pdfVIP

埋线预处理对ZDF大鼠缺血再灌注损伤的保护作用及机制研

究

王一茗;杨晓月;张新昕

【摘要】目的探讨埋线预处理对ZDF大鼠缺血再灌注损伤后心肌相关凋亡蛋白

Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响.方法2015年1月-2016年5月,选取SPF

级雄性ZDF大鼠24只,随机分为4组,每组6只.空白组常规饲养,不做任何处理.缺

血再灌注组饲养7d后缺血30min,再灌注60min.缺血预处理组饲养7d后缺血5

min,再灌注5min,反复3次后,缺血30min,再灌注60min.埋线预处理组第1天

对内关、膻中、心俞穴进行埋线,7d后缺血30min,再灌注60min.酶联免疫吸附

法检测血清过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)水平,Westernblotting法检测心肌

组织Bcl-2、Bax及Caspase-3表达,电镜观察心肌组织超微结构.结果缺血再灌注

组血清CAT、NO水平低于空白组,缺血预处理组、埋线预处理组血清CAT、NO

水平高于空白组、缺血再灌注组(P＜0.05).缺血再灌注组、缺血预处理组、埋线预

处理组Bcl-2、Bax及Caspase-3相对表达量均高于空白组,缺血预处理组、埋线

预处理组Bc1-2、Caspase-3相对表达量高于缺血再灌注组,Bax相对表达量低于

缺血再灌注组(P＜0.05).电镜下,缺血再灌注组心肌组织可见大量线粒体肿胀且密度

降低,呈囊泡状;缺血预处理组及埋线预处理组仅见少量线粒体肿胀.结论埋线预处

理可能通过上调心肌组织Bcl-2及Caspase-3表达,下调Bax表达,抑制细胞凋亡

和促进自噬,对ZDF大鼠缺血再灌注损伤后心肌发挥保护作用.

【期刊名称】《中国全科医学》

【年(卷),期】2018(021)014

【总页数】5页(P1699-1703)

【关键词】再灌注损伤;缺血预处理,心肌;埋线;自噬;细胞凋亡

【作者】王一茗;杨晓月;张新昕

【作者单位】212001江苏省镇江市,江苏大学附属医院针灸科;212001江苏省镇

江市,江苏大学附属医院针灸科;212013江苏省镇江市,江苏大学职工医院内科

【正文语种】中文

【中图分类】R619.9

急性心肌梗死（AMI）是全球范围内死亡及致残的主要原因之一［1］。对缺血心

肌进行及时有效的再灌注，减少缺血带来的损伤及缩小梗死面积是临床治疗目标。

然而，再灌注过程中可能引发缺血再灌注损伤（IRI），细胞凋亡是IRI过程中的重

要环节［2］。有研究显示，缺血预处理（IP）及其他预处理手段可发挥内源性保

护作用，从而减轻由缺血再灌注对心肌造成的损伤［3-4］。YAN等［5］指出，

IP与自噬有许多共同特征，自噬在IP减轻再灌注损伤且保护心肌方面具有重要作

用。而细胞凋亡又与自噬关系密切，且存在交互效应，两者具有多个共同的调控元

件，如Bcl-2、Bax、Caspase-3等。同时，多项研究均证实，针灸预处理可减轻

缺血再灌注对心肌造成的损伤，对心肌具有保护作用［6-9］。本研究探讨中医学

经典外治法穴位埋线对IRI后ZDF大鼠心肌细胞凋亡及自噬的影响。

1材料与方法

1.1实验动物2015年1月—2016年5月，选取SPF级雄性ZDF大鼠24只，8

周龄，体质量220～230g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司〔许可证号：

SCXK（京）2012-0001〕。本研究获得江苏大学附属医院生物医学研究伦理委员

会批准。

1.2主要试剂及仪器Tween-20、十二烷基硫酸钠（SDS）粉末（biotopped试剂

公司），Western专用脱脂奶粉（美国BD公司），甲叉双丙烯酰胺（美国

Sigma公司），Westernblotting、BeyoECLPlus及IP裂解液（上海碧云天生

物技术有限公司），Bcl-2、Bax及Caspase-3试剂盒（Abcam公司），过氧化

氢酶（CAT）及一氧化氮（NO）酶联免疫吸附试剂盒（上海慧颖生物科技公司）。

冷冻离心机（德国适马股份有限公司），SDS电泳仪和转膜仪、垂直凝胶电泳槽、

凝胶成像系统（美国Bio-rad公司）