白术乙醇提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响及其机制研究 .pdfVIP

白术乙醇提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响

及其机制研究

作者：赵建平吴丽敏鲁晓娜王辉王潘张振强徐江雁谢治深

来源：《中国药房》2021年第04期

摘要目的：研究白术乙醇提取物（AM）对秀丽隐杆线虫（简称“N2线虫”）寿命的影

响，并基于转录因子SKN-1/核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路探讨其作用机制。方法：

将N2线虫分为空白对照组、阳性对照组（100μmol/L姜黄素，下同）和AM低、中、高剂量

组（100、200、300μg/mL，下同），考察正常、氧化应激（40mmol/LH2O2）条件下AM对

N2线虫寿命的影响（以平均存活时间计）以及正常条件下AM对N2线虫繁殖能力的影响

（以子代数量计）。用700μmol/LH2O2建立小鼠神经瘤母细胞N2a氧化应激模型，采用

MTT法考察阳性对照和AM低、中、高剂量对模型细胞存活率的影响。人胚胎肾上皮细胞

293T转染Nrf2-抗氧化反应元件（ARE）质粒后，采用荧光素酶报告基因法考察阳性对照和

AM低、中、高剂量作用24h以及AM中剂量作用12、18、24h对Nrf2-ARE荧光素酶活性的

影响。采用实时定量聚合酶链式反应法考察阳性对照和AM低、中、高剂量对N2a细胞中

Nrf2下游抗氧化基因NQO-1、HO-1mRNA表达以及对N2线虫中SKN-1下游抗氧化基因

GCS-1、GST-7、GST-10、HSP-60、HSP-16.2、SOD-3mRNA表达的影响。结果：与空白对照

组比较，阳性对照组和AM各剂量组N2线虫在正常、氧化应激下的平均存活时间均显著延

长，第1天子代数量（除AM高剂量组外）、第2天子代数量（除AM低剂量组外）和总子代

数量（除AM低剂量组外）均显著增加（P

关键词白术;乙醇提取物;秀丽隐杆线虫;寿命;氧化应激;核因子E2相关因子2;SKN-1

ABSTRACTOBJECTIVE：TostudytheeffectsofAtractylodesmacrocephalaethanolextract

（AM）onlifespanofCaenorhabditiselegans（calledN2nematodeforshort），andto

investigateitsmechanismbasedontranscriptionfactorSKN-1/nuclearfactorE2relatedfactor2

（Nrf2）.METHODS：N2nematodeweredividedintoblankcontrolgroup，positivecontrol

group（100μmol/Lcurcumin，similarlyhereinafter），AMlow-dose，medium-doseandhigh-

dosegroups（100，200，300μg/mL，similarlyhereinafter）.TheeffectsofAMonthelifespan

（byaveragesurvivaltime）ofN2nematodeundernormalconditionandoxidantstresscondition

（40mmol/LH2O2）aswellasitseffectsonreproductivecapability（bythenumberoffilial

generation）ofN2nematodeundernormalconditionwereinvestigated.700μmol/LH2O2wasused

toestablishneuroblastomacellsN2aoxidantstressmodel.Effectsofpositivecontrol，low-dose，

medium-doseandhigh-doseofAMonthesurvivalrateofmodelcellsweredetectedbyMTTmethod.

Afterhumanembryonicrenalepithelialcells293T