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南昌大学抚州医学分院讲稿
实验九分光光度法测定水样中铁的含量
一、实验目的
1、了解利用可见分光光度法进行定量分析的原理和方法;
2、初步掌握分光光度计的使用方法,学习测绘溶液的吸光度;
3、掌握利用标准曲线法进行定量分析的操作与数据处理方法。
二、实验原理
在pH为和Fe3-9的溶液中,生成一种稳定的phen)邻二氮菲(邻菲罗啉,。
2+2+4-1-1
cmmolκ,其lgK=21.3,=1.1×10·橙红色络合物Fe(phen)L·-Fe邻菲
50832+2+
罗啉→[]络合物邻菲罗啉+Fe
(无色)(橙红色)
范围内遵守Lambert-Beer定律:铁含量在0.1~6μg·mLA=εbc=K·c
-1
其吸收曲线如下图所示。
邻菲罗啉铁(Ⅱ)的吸收曲线
,然后再加入邻二氮全部还原为Fe显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe菲,
3+2+
并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下:
↑+2H+NO+4H2Fe2FeOH·+2NHHC1=+2Cl用分光光度法测定物质的含
3+2++-222
量,一般采用标准曲线法,即配制一系列浓度的标准溶液,在实验条件下依次用
分光光度计测量各标准溶液的吸光度(A),以溶
1
页4共页第
南昌大学抚州医学分院讲稿
液的浓度为横坐标,相应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。在同样实验条件下,
测定待测溶液的吸光度,根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值,即
可计算试样中被测物质的质量浓度。
三、实验仪器与试剂
电子天平,容量瓶(25ml×7,或用比色管代替),刻度移液管(1ml,2ml,5ml,
10ml×2),752型分光光度计,1cm玻璃比色皿,滴管;2mmol/L铁标准
溶液,待测含铁水样,1.5mol/L盐酸羟胺溶液,8mmol/L邻
二氮菲溶液,1.0mol/L醋酸钠溶液,蒸馏水。
四、实验内容与步骤
溶液系列及待测溶液的配制1、标准Fe按表1所示,在编号为1-7的50mL
2+
容量瓶(或比色管)中分别按照表1的数据加入铁标准溶液或待测水样,然后分
别加入1.00mL1.5mol/L盐酸羟胺溶液,摇匀后放置2min,再各加入2.00mL
8mmol/L邻菲罗啉溶液、5.00mL1.0mol/L乙酸钠溶液,以水稀释至刻度,摇匀。
表1标准系列溶液和样品液的配制
实验序号1234567
/ml标准Fe溶液00.400.801.201.602.000
2+
/ml待测水样00000010.00
/ml盐酸羟胺1.001.001.001.001.001.001.00
/ml邻菲罗啉2.002.002.002.002.002.002.00
/ml醋酸钠2.002.002.002.002.002.002.00
)25.0025.0025.0025.0025.0025.0025.00
V稀释(
总
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