CCR7和 VEGF 在缺氧时视网膜血管内皮细胞中的表达及意义 .pdfVIP

CCR7和VEGF在缺氧时视网膜血管内皮细胞中的表达及意

义

底煜;陈晓隆;王爱媛

【摘要】目的：探讨CC族趋化因子受体7（CCchemokinereceptor7，CCR7）

和血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）在缺氧状

态下视网膜血管内皮细胞（retinalendothelialcell，REC）中的表达及意义。

nbr方法：恒河猴脉络膜－视网膜内皮细胞（RF／6A）分别在常氧和低氧

环境中培养，分为正常对照组、低氧对照组和治疗组。低氧对照组和治疗组分别采

用脂质体LipofectamineTM2000（LF2000）介导转染空载体质粒和

CCR7siRNA表达质粒。CCK8法检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞凋亡情

况；Westernblot和RT－PCR法检测三组RF／6A内CCR7、VEGF蛋白及

mRNA的表达情况。结果：低氧对照组较正常对照组比较及治疗组较正常对照组

和低氧对照组比较细胞生长速度明显减慢，增殖能力减弱，细胞凋亡率显著增加

（均为P＜0．05）；低氧对照组与正常对照组比较，RF／6A内CCR7、VEGF

蛋白及mRNA表达显著增高，均有统计学意义（tCCR7蛋白＝3．38，tVEGF蛋

白＝4．75，tCCR7mRNA＝4．27，tVEGFmRNA＝5．34，均为P＜0．05），

且二者表达呈正相关（r蛋白＝0．71，rmRNA＝0．83，均为P＜0．05）。

治疗组CCR7和VEGF的蛋白及mRNA表达较正常对照组和低氧对照组明显下降

（均为P＜0．05）。nbr结论：缺氧时REC中CCR7可上调VEGF的表

达，CCR7－VEGF信号途径在视网膜新生血管（retinalneovascularization，

RNV）形成的过程中可能具有潜在功能，CCR7siRNA有望成为防治RNV的一种

有效方法。%·AlM:ToexploretheexpressionandsignificanceofCC

chemokinereceptor7(CCR7)andvascularendothelialgrowthfactor

(VEGF)inretinalendothelialcell(REC)underhypoxia.

nbr·METHODS:Rhesuschoroid-retinalvascularendothelialcells(RF/6A)

wereculturedundernormoxicandhypoxicconditionsinvitroanddivided

intothenormoxiagroup,thehypoxiacontrolgroup(transiently

transfectedwiththevectorplasmid)andthetreatedgroup(transiently

transfectedwiththeCCR7siRNArecombinantplasmid).Plasmidswere

transientlytransfectedinRF/6AcellsusingLipofectamineTM2000

(LF2000).RF/6AcellsproliferationandapoptosisdetectedbyCCK8and

flowcytometryandtheproteinandmRNAexpressionofCCR7andVEGF

weremeasuredbyWesternblotandRT-PCR.nbr·RESULTS:Thecell

growthratebecameslowerandapoptosisratebecameincreasedinthe

hypoxiagroupthanthatinthenormoxia